- צבעים המשמשים במכתמים פשוטים
- 6 הצעדים לכתמים פשוטים
- שלב 1
- תַצְפִּית
- שלב 2
- תַצְפִּית
- שלב 3
- שלב 4
- תַצְפִּית
- שלב 5
- הפניות
המכתים אחת הוא מהיר הליך מכתים ופשוט שבו צבע יחיד משמש, אז זה נקרא פשוט. משמש בעיקר לקביעת המורפולוגיה והארגון של התאים שנמצאים במדגם.
תאים הם חסרי צבע באופן טבעי, ולכן יש צורך להראות אותם בדרך כלשהי כאשר הם נראים מתחת למיקרוסקופ.
תאי לחיים אנושיים מוכתמים על ידי מכתים פשוטים בכחול מתילן.
חשוב לציין כי הצבעים המשמשים מכתים פשוט חייבים להיות בסיסיים עם מטען חיובי (קטיוני), כך שהם יכולים להיקשר באופן ספונטני לדופן התא ולציטופלזמה.
מבנים סלולריים אלה טעונים באופן שלילי. זו הסיבה שהצבע הטעון לטובה נמשך לתאים ונקשר באופן ספונטני אליהם. לפיכך, כל התאים שנמצאים במדגם מוכתמים במהירות.
צבעים המשמשים במכתמים פשוטים
ישנם מספר כתמים בסיסיים בהם ניתן להשתמש במעבדה למיקרוביולוגיה. הנפוצים ביותר הם:
- כחול מתילן.
- סגול קריסטל.
- ירוק מלכיט.
- פוקסין בסיסי.
כל הצבעים הללו פועלים היטב בחיידקים מכיוון שהם טעו חיובי (קטיוני) יוני צבע (כרומופורים).
זמני ההכתמה ברוב הכתמים הללו הם קצרים יחסית. בדרך כלל הם נעים בין 30 שניות לשתי דקות, תלוי בזיקה של הצבע.
חשוב לזכור שלפני שמכתים מדגם על ידי מכתים פשוט, יש להרחיב אותה ולהתקבע לשקופית הזכוכית (השקופית); המדגם המורחב והקבוע נקרא מריחה.
6 הצעדים לכתמים פשוטים
שלב 1
הנח את השקופית על מתלה מכתים והחל את הכתם הרצוי. תן לזמן המקביל לפעול.
בדרך כלל מכתים פשוטים נמשכים כמה שניות עד מספר דקות, תלוי בכתם המשמש.
תַצְפִּית
בשלב זה חשוב לא לחרוג מהזמן המומלץ לצביעה המשמשת, מכיוון שגבישים עלולים להיווצר על הסדין, ולייצר מה שמכונה "חפצים" המעוותים את המורפולוגיה של התאים.
שלב 2
שוטפים היטב את מריחת המגלשה במים מזוקקים מבקבוק, או גם זורמים באטיות מי ברז, עד שהנגר מתבהר. זה בדרך כלל לוקח 5-10 שניות.
תַצְפִּית
אין למרוח את זרם המים ישירות על המריחה, כדי להימנע מכוחו של אותו נזק לדגימה.
אם אין לכם מים מזוקקים, תוכלו להשתמש במי ברז ללא בעיה מכיוון שהם לא ישפיעו על תוצאת הכתמה.
שלב 3
השליך את השקופית עם מגבות נייר סופגות בכיוון אחד וללא שפשוף. וודא כי החלק התחתון של השקופית נקי.
שלב 4
שימו לב למריחה מוכתמת מתחת למיקרוסקופ. התחל עם היעדים הרחוקים ביותר כדי לאתר בצורה נכונה את האזור שאתה רוצה לצפות בו. שנה את המטרה כדי להתקרב יותר למדגם.
תַצְפִּית
לצורך השימוש במטרה בהגדלה גבוהה יותר (בדרך כלל 100X), יש להשתמש בשמן טבילה, מכיוון שהדבר מסייע לאור לחדור טוב יותר והתמונה נראית חדה יותר. אין צורך להשתמש בכיסוי כיסוי.
שלב 5
לבסוף, השלך את כל הדגימות בכלי מתאים המסומן כראוי "ביו-סיכון".
הפניות
- (2001). יישומי מיקרוביולוגים: המעבדה ידנית במיקרוביולוגיה הכללית (8 th ed.). חברות מקגרו-היל.
- Harisha, S. (2006). מבוא לביוטכנולוגיה מעשית (1 רח ' ). חומת אש מדיה.
- Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). מכתים ראשוניים של חיידקים: כתמים פשוטים. פרוטוקולים נוכחיים במיקרוביולוגיה, (נספח 15), 1-5.
- Pommerville, J. (2013). היסודות של מעבדת המיקרוביולוגיה של אלקמו (י ' ). ג'ונס וברטלט למידה.
- Prescott, H. (2002). תרגילי מעבדה במיקרוביולוגיה ( ה ' ). חברות מקגרו-היל.
- Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). עקרונות המיקרוביולוגיה (1 רחוב ). חינוך טאטא מקגרו-היל.