- בָּסִיס
- מאפיינים
- הרכב
- להשתמש
- תהליך
- מכתים של מבנים פטרייתיים של תרבויות
- מכתים מדגמים ביולוגיים ישירים
- מכתים בצינור הנבט בזיהוי של
- גיליון נתוני בטיחות לקטופנול
- בְּרִיאוּת
- דלקות
- חוסר יציבות
- סכנות מיוחדות
- הפניות
כחול lactophenol או כותנה כחולה מוכן עם מאפייני צבע יחיד. הוא משמש במעבדות קליניות בעיקר לצבעים של מבנים פטרייתיים כמו היפות, צינורות נבט ונבגים.
זה עוזר באבחון החזקה או הראשונית של פטריות מסוימות, עם זאת, תמיד מומלץ לחזק את האבחנה באמצעות בדיקות ספציפיות יותר, כמו בדיקות ביוכימיות או סרולוגיות.
ייצוג גרפי של כתם כחול לקטופנול, מריחה מוכתמת בכחול לקטופנול, רכוב במיקרוסקופ. מקור: Public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8
כחול לקטופנול מורכב מחומצה לקטית, כחול אנילין, גליצרין, פנול ומים מיוניזים. ניתן להכין אותו במעבדה או לרכוש אותו מוכן לשימוש. לאחר הכנתו הוא מוכן לשימוש, בשום פנים ואופן אין לדללו אותו, מכיוון שפעולה זו תביא לתוצאות איומות.
ריכוז מרכיביה הופך אותו לאידיאלי להכתמת מבנים פטרייתיים, שכן פנול מבטל את המיקרוביוטה החיידקית הנלווית, ואילו חומצה לקטית מייצרת סרט מגן סביב מבנה הפטרייה. לבסוף, לכחול אניני יש זיקה לדבוק במבנים פטרייתיים.
בָּסִיס
בכחול לקטופנול מתבצע צביעה פשוטה של המבנים הפטרייתיים של תרבות מיקולוגית מסוימת. זה נקרא פשוט מכיוון שהוא משתמש רק בצבע צבע אחד.
כחול לקטופנול, מלבד מכתים, משמש גם כמבהיר של הדגימה, הודות לפעולה המשותפת של חומצה לקטית ופנול, בנוסף, הפנול מתנהג כמורדנט ובו זמנית מונע את תמוגה של המיקרואורגניזם על ידי עיכוב האנזימים ההידרוליטיים אשר יכול להיות נוכח.
ואילו חומצה לקטית שומרת על המורפולוגיה של מבני הפטרייה.
מצד שני, לכחול אניני יש את המאפיין של הדבקה או כריכה למבנים המכילים צ'יטין. המבנים מוכתמים בתכלת.
יש לציין כי דופן התא של מיקרואורגניזמים פטרייתיים, בעיקר תבניות, מכילה צ'יטין, וזו הסיבה שצבע זה הוא אידיאלי להכתמת מיקרואורגניזמים אלה.
מאפיינים
תמיסת כחול לקטופנול היא צבע מימי מאוד חומצי, מעונן מעט, עם צבע כחול בהיר. הוא נשאר יציב אם הוא מאוחסן בין 15 ° C ל- 25 ° C. יש לשמור על הבקבוק סגור כראוי. זה מעצבן ומאכל בעור ובריריות הריריות.
הרכב
הנוסחה להכנת ליטר אחד של כחול לקטופנול היא כדלקמן:
-250 גר '/ ל' חומצה לקטית
-1.0 גר '/ ל כחול אנייל או כחול מתיל
-500 גרם לליטר גליצרין
-250 גרם / ל פנול
-250 מ"ל מים מיובנים או מזוקקים.
הפנול מומס במים שהתחממו בעבר. חומצה לקטית וגליצרין מוסיפים ומערבבים היטב. לבסוף, כחול האנילין מתמוסס. זה מתערבב ומוכן לשימוש.
החלקים להכנת 80 מ"ל של תמיסת כחול לקטופנול הם:
-20 גרם גבישי פנול
-20 מ"ל של חומצה לקטית
-40 מ"ל גליצרין או גליצרול
-20 מ"ל מים מזוקקים.
להשתמש
הוא משמש לכתמת מבנים פטרייתיים, ובאמצעות המאפיינים המורפולוגיים הנצפים ברמה המיקרוסקופית, כדי להיות מסוגל לאבחן את הפטרייה.
תהליך
מכתים של מבנים פטרייתיים של תרבויות
- קח תרבות טהורה של הפטרייה שצפייה במבנהיה.
- רצוי לעבוד במכסה זרימה למינרית, או מתחת למצת, באמצעות מסכה וכפפות, מכיוון שיש צורך לעמוד בתקני הבטיחות הביולוגית, מכיוון שרוב התבניות קלות להתפשטות בסביבה ולכן מהוות סכנה עבור המפעיל.
- טיפה של כחול לקטופנול מונחת על שקופית.
- חותכים ריבוע קטן של סרט הדבקה באיכות טובה והדבקו בזהירות רבה עד לסוף ידית הפלטינה הקרה והמעוקרת.
- ידית הפלטינה מקרבת את החלק השטחי ביותר במושבה הפטרייתית ונגיעה בתרבות בזהירות רבה, בדיוק במקום בו נמצאת סרט ההדבקה.
ואז מועברים לשקופית ומונחים ישר על טיפת הכחול לקטופנול, ודואגים שהקלטת מורחבת בצורה מושלמת ומשומנת עם הצבע. ידית הפלטינה מוסרת מאוד בעדינות.
- טיפה נוספת של כחול לקטופנול מונחת על הקלטת ומכסה החלקה למעלה. אל תפעיל לחץ רב מדי כדי לא להרוס את מבני הפטרייה, מכיוון שהם שבירים במיוחד. יש לאפשר לצבע לפעול כ 3 עד 4 דקות.
לאחר זמן זה, התכשיר מוכן לצפייה תחת מיקרוסקופ בהגדלה 10X או 40X. אם יש צורך בתצפית 100X, יש להשתמש בשמן טבילה.
- מבני הפטרייה, באופן כללי, הם מוכתמים בכחול, למעט הפטריות ההרסניות שישמרו על צבעם החום האופייני לסוג זה של פטריה.
מכתים מדגמים ביולוגיים ישירים
אם זה נדרש ללמוד דגימה ביולוגית ישירה, כמו כיח, מוגלה, אקסודטים, הפרשות, בין היתר, אלה צריכים לעבור הליך קודם לפיזור הדגימה. פתרון NaOH משמש לשם כך.
במקרה של דגימות שיער ניתן לצבוע אותן ישירות.
מספר שערות מושפעות (10 בסך הכל) נלקחות מהנגעים החזקים ב- tinea Capitis (אזורים אלופקים) ומונחות על שקופית (3 עד 4 שערות בשקופית). כמה טיפות של כחול לקטופנול מונחות על גבין ומכוסות מייד בשקית כיסוי.
אחז במגלשה במלקחיים ולחמם בעדינות מעל צורב. לשם כך יש לבצע 3 עד 4 מהירות מהירה דרך הלהבה. התבונן במיקרוסקופ בגודל 40X וחפש נבגים מחוץ או בתוך השיער (ectothrix או endothrix בהתאמה). במידת הצורך הוסף שמן טבילה וצפה ב 100X.
מכתים בצינור הנבט בזיהוי של
לאחר דגירת התרבות החזקה של קנדידה אלביקנס בסרום אנושי במשך שעתיים עד 4 שעות ב 37 מעלות צלזיוס, נלקח חלק מהפתרון ומוכתם בכחול לקטופנול. התכשיר נצפה תחת המיקרוסקופ בגודל 40X. צינור הנבט קיים והפיצוציות מכתימות בכחול בהיר.
גיליון נתוני בטיחות לקטופנול
האיגוד הלאומי להגנת אש (NFPA), קובע את גיליון נתוני הבטיחות של חומרים כימיים מבחינת הסיכון שהוא מייצג על פי היבטים שונים, אלה מסומלים על ידי יהלום צבעוני ומספר שנע בין 0- ארבע.
סכנות בריאותיות מזוהות בכחול, דליקות באדום, חוסר יציבות או תגובתיות בצהוב, וכל סכנה מיוחדת בצבע לבן.
בְּרִיאוּת
הסיכון הבריאותי שמוצג כחול לקטופנול על פי ה- NFPA הוא ברמה 3. משמעות הדבר היא שהחומר מסוכן ביותר בעת נטילתו או במגע ישיר עם עור או ריריות.
זהו חומר מאכל ומרגיז מאוד.
במגע עם עור וריריות זה גורם לכוויות קשות.
אם נבלעים זה יכול לגרום לכאבי ראש, בלבול, עייפות, חוסר הכרה, דום נשימה ואפילו מוות.
דלקות
על פי ה- NFPA, הלקטופנול כחול דורג לדרגה 1 בדליקות. המשמעות היא שהיא נשרפת רק אם היא מחוממת מעל 94 מעלות צלזיוס.
חוסר יציבות
רשום על פי ה- NFPA ברמה 0 (אפס) מבחינת תגובתיות. המשמעות היא שאין לה שום סיכון לתגובה, כלומר מדובר בחומר יציב כימית.
סכנות מיוחדות
אין בו סכנות מיוחדות נוספות.
הפניות
- מעבדת SAR. לקטופנול כחול. 2010. זמין ב: labsar.com.
- מעבדה כימית קלינית יישומית. לקטופנול כחול. 2015. ניתן להשיג ב: cromakit.es
- מעבדות מרק. מיקרוסקופיה כחולה לקטופנול בתמיסה. 2017. זמין ב: משתמשים / Equipo / הורדות
- כרטיס חירום. תמיסת כחול לקטופנול לכתמים פטרייתיים. Universidad Pontificia Javeriana, בוגוטה קולומביה. 2014. זמין בכתובת: javeriana.edu.co
- González M, Diamont D, Gutiérrez B. טכניקה להכתמת מבנים פטרייתיים עם צבעי ירקות כתחליף לא מזהם. ביוגרו, 2011; 23 (1): 65-68. ניתן להשיג ב: Redalyc.
- מעבדה הימדיה. כותנה לקטופנול כחולה. 2017. זמין מ: himedialabs.com
- Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, שחקן J, Dasgupta A. בדיקות ביוכימיות וטכניקות מכתים לזיהוי מיקרוביאלי. Science Direct, 2017; 61-73. ניתן להשיג אצל: Elsevier