ספרנין: מאפיינים, שימוש, טכניקות, רעילות - כִּימִיָה - 2025

Safranin הוא צבע meriquinoide, על שם המבנה הכימי שלה שיש שתי טבעות benzenoid ושל 2 טבעות quinoid, שהאחרון אלה המספקים את הצבע האדום.

זה נקרא גם דימתיל ספראנין או אדום בסיסי 2 בצורתו הקצרה, מכיוון ששמו המדעי הוא 3,7-דימינו-2,8-דימתיל-5-פניל-פניזמיניכלורו דימתיל ספראנין והנוסחה הכימית היא C ₂₀ H ₁₉ N ₄ Cl.

מבנה כימי של ספרנין המציין טבעות בנזנואידים וקינואידים / תמיסה מימית של ספרנין. מקור: NEUROtiker בעריכת MSc. מריאלסה גיל / LHcheM

יש גרסה הנקראת טרימתיל-ספרנין אך אין הבדל משמעותי בין שני החומרים.

ספרנין הוא צבע מונוכרומטי, ובהתאם למאפייני הפורמולה הכימית, הוא חומר טעון חיובי. לכן יש לזה זיקה למבנים טעונים שלילית. מבנים אלה יהיו מוכתמים בצבע אדום.

מאפיין זה מעניק לו תחולה בטכניקות היסטולוגיות רבות להכתים מבנים תאיים שונים, הן של אורגניזמים אוקיארוטיים והן פרוקריוטיים.

ספרנין משמש כצבע ניגוד בטכניקות חשובות ומוכרות לשימוש שגרתי בבקטריולוגיה. טכניקות אלה הן: כתם גראם-האקר, כתם שפר פולטון לנבגים או מכתים של כמוסות חיידקיות, בין היתר.

מאפיינים

צבע הזעפרן (תבלין המתקבל מהסטיגמות של פרח הסיבוס קרוקוס) היה ההשראה לנקוב בשם צבע זה. מהמונח זעפרן מגיע שמו של ספרנין. זה נובע מהדמיון הרב בין צבע הזעפרן לצביעה שמספק צבע זה.

ספרנין זמין כגבישים או כאבקה, שתי המצגות מסיסות במים. צבע הספרנין חסר ריח. כתמים מבנים אדומים. מבנים שמושכים צבע ספרנין נקראים ספראנופילים.

מבחינה מבנית ספראנין הוא מורכב, יש לו שני טבעות בנזנואידים בקצותיהם ובמרכזם שתי הטבעות הקינואידיות בהן נמצא הקטיון N ⁺ . מרכז המבנה הוא המערכת האחראית על אספקת הצבע. בשל מאפיין זה, צבע זה מסווג בקטגוריה II.

להשתמש

ספרנין משמש לכתמת מבנים שונים. מדגיש במיוחד את תאי הקולצ'יצקי שנמצאים בדרכי העיכול, המכונים גם תאי enterochromaffin.

הוא מסוגל להכתים מיקרואורגניזמים השייכים למשפחת Rickettsiaceae. כמו כן, משתמשים בו בטכניקות שונות, כמו שיטת קוסטר, שונה לשימוש בכדי להכתים חיידקים מהסוג ברוסלה.

לעומת זאת, ספרנין משמש בטכניקת הכתמת נבגים של שפר פולטון ובכתמי גראם-האקר. בשתי הטכניקות, ספרנין פועל כצבע ניגוד.

בראשון, הנבגים לוקחים צבע ירוק מלכיט ושאר המבנים אדומים על ידי ספרנין. בשלב השני, חיידקי הגראם השליליים מאבדים את צבעו של הגביש הסגול בשלב הצבע, לכן ספרנין הוא זה שמכתים את חיידקי הגראם השליליים באדום.

בנוסף, ספרנין משמש בבקטריולוגיה להכנת מדיה אגר של ברוסלה בדילול של ספרנין 1: 5000. מדיום זה משמש להבדיל בין מיני ברוסלה סוויס משאר המינים. Brucella melitensis ו- Brucella abortus גדלים על מדיום זה אך B. suis מעוכב.

בתחום האגרו-תעשייתי נעשה שימוש בספרנין ב- 2.25% ודולל 1:10 כדי להכתים דגימות של גזע צמח קנה הסוכר.

צמח זה מושפע לרוב על ידי תת החיידק Leifsonia xyli. xyli, הפוגע בקסילם של הצמח. נבדקים הגבעולים המוכתמים כדי לקבוע את תפקודם של כלי הקסילם.

טכניקות בתחום הבקטריולוגיה

כתם Castañeda לכתמים r

מריחת דם או רקמות מונחת בתמיסת חיץ (חיץ פוספט pH 7.6). אפשר להתייבש באופן ספונטני ואז מכסים בכחול מתילן למשך 3 דקות וסומכים בספרנין. Rickettsiae הם בצבע כחול, מנוגדים לרקע האדום.

כתם קוסטר שונה עבור

מריחה מיוצרת ומבעירה במצת למקבע. לאחר מכן, הוא מכוסה בתערובת של 2 חלקים של ספראנין מימי רווי עם 3 חלקים של תמיסה 1 mol / L KOH, למשך דקה אחת. השטיפה מתבצעת במים מזוקקים ומסוכנת עם 1% כחול מתילן קרבולי.

אם הדגימה מכילה חיידקים מהסוג ברוסלה, הם יופיעו כתומים על רקע כחול.

מכתים של כמוסות בקטריאליות

תערובת של השעיית חיידקים מיוצרת עם דיו בהודו ומתווספת ספרנין. מתחת למיקרוסקופ, תופיע הילה אדמדמה סביב כל כמוסת חיידקים עם רקע שחור.

כתמי נבגים

התפשטות נעשית עם ההשעיה החיידקית. ואז הוא קבוע לחום. הוא מכוסה בירוק מלכיט 5%, בוער לעיתים קרובות עד פליטת אדים. התהליך חוזר על עצמו במשך 6-10 דקות. לבסוף, הוא נשטף במים ומוחלף עם 0.5% ספרנין למשך 30 שניות. הבצילי מוכתם בצבע אדום והנבגים ירוקים.

כתם גראם-האקר

מריחה מיוצרת בתליה של חיידקים ומקובעת בחום. מכסים את השקופית בסגול קריסטל למשך דקה. ואז לוגול ממוקם כפתרון מרדני למשך דקה. לאחר מכן הוא מולבן באלכוהול אצטון ולבסוף מונה בספרנין למשך 30 שניות.

חיידקים גראם חיוביים מכתימים סגול כחלחל וחיידקים גראם שליליים אדומים.

מעבדות מסוימות הפסיקו להשתמש בטכניקת Gram-Hucker כדי לאמץ את טכניקת Gram-Kopeloff ששונתה. באחרון מוחלף ספרנין בפוקסין בסיסי. הסיבה לכך היא שספרנין מכתים בצורה חלשה מינים של בני המין לגיונלה, קמפילובקטר וברוסלה.

טכניקות בתחום ההיסטולוגיה

מכתים של תאי קולצ'יצקי (enterochromaffins)

קטעי רקמות ממערכת העיכול מוכתמים בכלוריד כסוף. לאחר מכן הוא מפולט את צבעו עם נתרן תיוסולפט ולבסוף מונה עם ספראנין.

תאי קולצ'יצקי נבדלים על ידי נוכחות גרגירים שחומים-שחורים.

כתם של דלקת מפרקים ניוונית

מכיוון שלספרנין יש מטען חיובי, הוא נקשר היטב לקבוצות הקרבוקסיל והסולפט של הגליקוזאמינוגליקנים. אלה הם חלק מהפרוטאוגליקנים המרכיבים את הסחוס המפרקי. במובן זה, כאשר מכתים בספרנין O, ניתן לזהות האם יש אובדן סחוס או לא.

ניתן למדוד את אובדן הרקמה הסחוסית באמצעות סולם מנקין או נקרא גם סולם דלקת מפרקים ניוונית.

הטכניקה מוסברת להלן: החלק ההיסטולוגי שקוע במגש עם תמיסת המטוקילין הברזל של ווייגרט, ואז עבר דרך אלכוהול חומצי ונשטף במים.

המשך בתהליך הצביעה על ידי טבילת היריעה בירוק מהיר, הוא נשטף בחומצה אצטית ועכשיו הוא טובל בספרנין O. לסיום התהליך הוא מתייבש באמצעות אלכוהולים בריכוזים שונים בסדר עולה. השלב האחרון דורש הבהרת קסילן או קסילן.

השקופיות מותנות בבלסם קנדה או דומה לצפייה תחת המיקרוסקופ.

בעזרת טכניקה זו הגרעינים מוכתמים בשחור, העצם ירוקה והסחוס בו נמצאים הפרוטאוגליקנים אדומים.

כתם לזיהוי מקרו-אצות

פרז ואח 'בשנת 2003 הציעו טכניקה פשוטה וזולה לצביעת מקרו-אצות. הדגימות מוכנות בחלקים היסטולוגיים של פרפין. החלקים מקובעים בגליצרין של 1%, ומאפשרים להם להתייבש לחלוטין. לאחר מכן מניחים אותו ב- Xylol בכדי להסיר את הפרפין.

המקטע מתייבש מחדש על ידי העברתו דרך סדרת מגשים המכילים אתנול בדרגות ריכוז שונות (סדר יורד), למשך 2 דקות בכל אחת מהן.

בהמשך הוא מוכתם למשך 5 דקות בתערובת 3: 1 של ספרנין של 1% עם תכלת טולידין 1%, שתיהן מוכנות עם 50% אתנול. לתערובת מתווספות שלוש טיפות של חומצה פיקרית, המשמשת כמרדנט.

ואז הוא מתייבש בכך שהוא שוב עובר במגשי האלכוהול, אך הפעם בצורה עולה. לבסוף, הוא שטוף עם קסילול והדגימה מוכנה עם בלסאם מקנדה לצפייה.

רַעֲלָנוּת

למרבה המזל, ספרנין הוא צבע שאינו מהווה סכנה למי שעוסק בו. זהו צבע לא מזיק, הוא אינו מסרטן והוא אינו דליק.

מגע ישיר עם העור או הרירית יכול לגרום לאדמומיות קלה באזור, ללא סיבוכים גדולים. לשם כך, מומלץ לשטוף את האזור הנגוע בהרבה מים.

הפניות

1. García H. Colorante safranina טכנאי בריאות, 2012; 1 (2): 83-85. ניתן להשיג ב: medigraphic.com
2. כתם גיל מ. גרם: בסיס, חומרים, טכניקה ושימושים. 2019. זמין ב: lifeder.com
3. מכתים גיל מ 'ספורה: רציונל, טכניקות ושימושים. 2019. זמין ב: lifeder.com
4. ספרנינה. " ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 7 מרץ 2017, 10:39 UTC. 3 אוגוסט 2019, 20:49 en.wikipedia.org
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. טכניקת מכתים שימושית בפרשנות האנטומית של טוויפרונים של Gracilariopsis ו- Gracilaria chilensis (Rhodophyta). מעשה בוט. ונציה. 2003; 26 (2): 237-244. ניתן להשיג ב: scielo.org.
6. כנסיית אילות, פרלטה אסתר ליליה, אלברז אלבה, מיליאן ג'יי, מטוס מאדיו. הקשר בין הפונקציונליות של כלי הקסילם ונוכחות תת-המין Leifsonia xyli. קסילי. הכמרית הגנה. 2007; 22 (1): 65-65. ניתן להשיג ב: scielo.sld