אורצ'ין: יסוד והכנה - כִּימִיָה - 2025

Orceína הוא טבעי בצבע סגול, שחולץ מן החזזיות שונות כמו orchilla או archill, fruticose חזזיות Rocella tinctoria ו Lecanora parella בעיקר. טינקטוריה רוצ'לה נמצאת ביבשת אפריקה ואמריקאית, אם כי ניתן להחליפה במינים אחרים הנמצאים באירופה.

כתם זה נעשה שימוש נרחב במחקרים ציטוגנטיים מאז ימי קדם. במובן זה, הכנת האורצ'ין הכוללת חומצה אצטית הוצגה על ידי LaCourt בשנת 1941, וזו הסיבה שהיא נקראה בתחילה טכניקת LaCourt.

מבנה כימי של תמיסת אורצין ואורצין. מקור: Wikipedia.org/ Oguenther ב- de.wikipedia (ד"ר גוונטר)

כמו כן, בגלל הפשטות והעלות הנמוכה שלו, הוא שימש לייצור לקמוס (צבע המופק מחזזיות) ובמחקרים היסטולוגיים (מכתים תאים ורקמות).

מספר מחקרים השתמשו בכתמה זו בשילוב עם כימיקלים אחרים, כגון אמוניה פיקקרקרמינאט וחומצה אצטית, כדי להכתים סיבים אלסטיים וכרומוזומים בהתאמה. נכון לעכשיו, אורצ'ין ממשיך להשתמש במחקרים ציטוגנטיים על בעלי חיים וצמחים.

לאחרונה סילבה ואח '. 2017 השתמשה בהצלחה בכתם זה בכדי להתבונן בשינויים השונים המתרחשים בסיבים האלסטיים בעור האגודל אצל מבוגרים צ'יליאנים. מחקר זה חשף כיצד סיבי האגודל משתנים עם ההזדקנות.

במובן זה, נצפו כי הסיבים האלסטיים הם בצבע חום-שחור בצבעים אצל אנשים שגילם יותר מ -80 שנה. בעוד שבצעירים ביותר (מגיל 60) הם נראים כחומים-אדמדמים. הציטופלזמה ומבני תאים אחרים הופכים לירוקים-ירקרקים.

זה איפשר לאשש את נוכחותם ומצבם של הסיבים האלסטיים, מבחינת מיקומם, כמותם ושלמותם. מצד שני, צוין גם כי אורצין עוזר מאוד בזיהוי מפרצות ואבחון עורקים, בין שאר המצבים.

בָּסִיס

אורצ'ין הוא חלק מקבוצת הצבעים האוקסזינים, והכתמים מבוססים על זיקתו ל DNA. הצבע נקשר למטען השלילי של מולקולה זו המיוצגת על ידי קבוצת הפוספטים. לכן הכרומוזומים מוכתמים בסגול.

עם זאת, שאר מבני התא מתאפיינים בצבע אחר. באופן ספציפי, במקרה של סיבים אלסטיים, מדובר בצבעי תא אדמדם-חום, מכחול עד סגול כהה, ואילו קולגן אינו מכתים.

מסיבה זו, אורצ'ין משמש לכתמת הכרומטין ולהבדלת המין בכמה זבובים. כמו כן, ניתן להכתים גרעינים וכמה תכלילים בכבד המיוצרים על ידי אנטיגנים של הפטיטיס B.

לפתרונות Orcein יש פונקציות ספציפיות בכתמים. לאורצ'ין A יש את התפקיד של ריכוך קרומי התאים, גורם למותם ומשתק את תהליך חלוקתם. בינתיים, אורצ'ין B אחראי על השלמת הכתמה על ידי הדבקה שלו לכרומוזומים.

הכנה

תמיסת אצטו-אורצין 1%

כדי להכין תמיסה של% 1 של aceto-orcein, 2 גרם של אורצין מומסים ב 45 מ"ל של חומצה אצטית קרחונית, רצוי חמים, ומוסיפים 55 מ"ל מים מזוקקים בטמפרטורת החדר.

לאחר מכן, הוא מעורבב כל הזמן כדי להפוך את הפיתרון להומוגניזציה, ומאוחר יותר לתת לו לנוח עד שהוא מתקרר. לבסוף, הוא מאוחסן בחום של 4 מעלות צנצנות כהות. תכשיר זה שימש פלורס 2012 לצפייה בשלבי ההתבגרות של ביציות פרות.

במקרה זה, למשל, תמיסת האצטו-אורצין מונחת על הרקמה שקיבלה בעבר בחומצה אצטית אתנול למשך 24 שעות. תהליך מכתים זה מתבצע במשך 30 דקות והרקמה לאחר מכן משתנה.

כמו כן, ניתן להשתמש בו בזיהוי האברונים ברקמות רב-תאיות. במקרה זה, מריחה של רירית הגזית מוכתמת בטיפה של תמיסת האצטו-אורצין, מכסה הכיסוי מונח על השקופית וניתן מיד לצפות בגרעין התא עם מבניו.

תמיסת לקטו-פרופוניק אורצין 1%

בנוסף, ניתן להכין אורצין יחד עם כימיקלים אחרים כמו חומצה לקטית וחומצה פרופיונית. לשם כך, מומסים גרם אחד של אורצין בתמיסה מעורבת מראש בטמפרטורת החדר של 23 מ"ל של חומצה לקטית ו- 23 מ"ל של חומצה פרופיונית; ממלא את הנפח עם מים מזוקקים עד 100 מ"ל.

בעזרת תמיסת אורצין לקטו-פרופוניונית זו ניתן לצפות בשלבים השונים של חלוקה מיוטית של תאי צמחים. במקרה זה, הדגימה המקובעת וההידרוליזה מונחת למשך 15 דקות בתמיסת האורצין הלקטו-פרופוניוני ואז הרקמה נפרסת על שקופיות מיקרוסקופ.

במחקר של Duque 2016 על כרומוזומים פוליגניים, הוא השתמש בתכשיר של 2 גרם אורצין מדולל בחומצה אצטית ו- 85% חומצה לקטית, תוך דילול בתמיסה של 65% חומצה אצטית. לבסוף הוא הביט בכרומוזומים בבלוטות הרוק של תסיסנית המלנוגסטר.

אורצ'ין א 'ואורצ'ין ב'

חשוב לציין כי תלוי במדגם ובמה שיש להעריך, נערך פיתרון האורצ'ין המתאים. כך, למשל, חומצה הידרוכלורית 1N מתווספת לפתרון אורצ'ין A בכדי לצפות בתאים המתחלקים.

ואילו תמיסת האורצ'ין B מומסת ב 45% חומצה אצטית. טכניקה זו היא שיטת מכתים מקוצרת ומשמשת בדרך כלל כתוספת להכתמת מבנים כרומוזומליים.

מחשבות אחרונות

מאז מאות שנים, חזזיות כמו לקנורה, פרמליה ואומביליקריה ניתן למצוא במדינות ביבשת אמריקה כמו ארגנטינה, שהן מקורות נהדרים לאורצ'ין. גם אזורים אירופיים כמו האיים הקנריים היו באותה תקופה מפיקים גדולים של התזמור.

זה היה מיוצא לערים אחרות באותה יבשת כמו גנואה ומדינות כמו אנגליה, בעוד הולנד מונופולין ייצור של ליטמוס מהתזמור. לכן, חזזית זו הופחתה מאוחר יותר עד שהיא עמדה להיכחד.

זה הוביל לכך שהאורגיליה הוחלפה על ידי צמחים אחרים בעלי תכונות צבע. עם זאת, הופעתם של צבעים סינטטיים תרמה להפסקת הסחר בחזית מקור אורצ'ין זה.

זה היה אפשרי הודות לקוקק, אשר תיאר בשנת 1812 את הסינתזה של אורצין, לאחר שידע כי הוא מסונתז על ידי תרכובת פנולית בשם אורצינול. עם זאת, למרות זאת, אורצין טבעי הוא עדיין המועדף כיום.

זה יכול להיות בגלל שאורצינול הוא תרכובת בעלת ריח חזק מאוד, וחשיפתו הממושכת עלולה להוביל לסיכונים בריאותיים, כמו אובדן היכולת לזהות ריחות. נזקים אלה יותרת יותרת המוח עלולים לעבור בין זמני לקבוע ככל שהחשיפה תהיה גדולה יותר.

הפניות

1. Ortega L, García R, Morales C. «יישום של לקאז המיוצר על ידי פטריות להשפלת צבעים מיקרוביולוגיים (אורצין וסגול סגול).» צעירים במדע 2. 2015; 633-637. ניתן להשיג ב: jovenesenlaciencia.ugto.mx.
2. ברקט ג'יי אורצ'ינה וסיבים אלסטיים. רפואה (בואנוס איירס) 2003; 63: 453-456. ניתן להשיג ב: Medicinabuenosaires.com.
3. סילבה J, Rojas M, Araya C, Villagra F. מאפיינים היסטולוגיים של עור הפנים האגודל המעופף אצל אנשים צ'יליים עם דהייה בדקטילוגרמה. ג'יי מורפול. 2017; 35 (3): 1107-1113. ניתן להשיג ב: scielo.conicyt.
4. Orrillo M, Merideth B. "ביולוגיה רבייתית של תפוח אדמה וציטוגנטיקה." מרכז תפוחי אדמה בינלאומי (CIP). מדריך טכני. ניתן להשיג ב: research.cip.cgiar.org/
5. פלורס פ. «אוסף, תרבות והתבגרות חוץ גופית של ביציות פרות (בוס מזל שור) ברמות הבוליביות." . האוניברסיטה הלאומית של Altiplano, פונו-פרו; 2012. ניתן להשיג ב: repositorio.unap.edu.pe.
6. כרומוזומים פוליטיים: Duque C. מבט על תופעת הכפילה האמורה. האוניברסיטה הלאומית של קולומביה, מדילין; 2016. זמין ב: edu.
7. קמארנה פ. ביולוגיה תאית ומולקולרית. תרגול מדריך. האוניברסיטה האוטונומית של באחה קליפורניה. 2017. ניתן להשיג ב: pez.ens.uabc.mx.
8. FAO / IAEA. 2018. מדריך להבדלת לודני אנסטרפה פראיים וגדלים (לואו) זבובים מהזן הרגיל ("דו-מיני") ומזן המין הגנטי (Tapachula-7), מוקרן ולא מוקרן. Guillen Aguilar JC, López Muñoz L, López Villalobos EF ו- Soto García DN ארגון המזון והחקלאות של האו"ם. רומא, איטליה, 95 עמ '.
9. אורצ'ין. (2018, 30 בנובמבר). ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. תאריך ייעוץ: 03:38, 31 ביולי, 2019 es.wikipedia.org.
10. מרק מיליפור. (2018, 16 ביולי). מיקרוסקופיה של אורצ'ין למיקרוסקופיה של Certistain. ניתן להשיג ב: merckmillipore.com