סים בינוני: בסיס, הכנה ושימושים - ביולוגיה - 2025

בינוני SIM הוא אגר מוצק למחצה ואת ההפרש, אשר תוכנן במיוחד כדי לעזור לזהות חיידקים מסוימים, במיוחד Enterobacteriaceae. הוא מורכב מטריפטין, פפטון, ברזל סולפט, אמוניום סולפט, נתרן תיוסולפט ואגר.

מדיום זה מאפשר ביצוע שלוש בדיקות חשובות: ייצור מימן גופרתי (H ₂ S), היווצרות אינדול ותנועתיות, ומכאן ראשי תיבות ה- SIM. בשל התועלת הרבה שלה, זה לא יכול להיעדר במעבדה לחיידקים.

A. בינוני SIM מסחרי B. SIM H2S (-), מבחן Indole (-) ותנועתיות (+) מבחן ו- SIM H2S (+), מבחן Indole (-), תנועתיות (+). מקור: א. צילום שצולם על ידי הסופר MSc. מריאלסה גיל ב. מפלאייזה

בניגוד לתקשורת אחרת, עליו להיות מוצק למחצה בכדי שניתן יהיה לגלות את יכולת התנועה של כמה חיידקים. במובן זה, בדיקה זו עובדת טוב מאוד עבור Enterobacteriaceae, אך לא במוטות גראם-שליליים שאינם מותססים, שם עדיפות שיטות אחרות, כגון טיפת תלייה.

מדיום ה- SIM מאפשר להבחין בתכונות ספציפיות מסוימות המאפיינות חיידקים מסוימים ביחס לאחרים. לדוגמה, Escherichia coli נבדל על ידי היותם H ₂ S (-), Indole (+) ותנועתיות (+), ואילו Proteus mirabilis הוא H ₂ S (+), indole (-), תנועתיות (+).

בָּסִיס

זהו מדיום תרבות הנחשב דיפרנציאלי, מכיוון שהשימוש בו מבדיל בין מיקרואורגניזמים המסוגלים לייצר מימן גופרתי מאלו שאינם; זה גם מדגיש את אלה שיוצרים אינדול מ טריפטופן מאלו שאינם, ולבסוף מבדיל חיידקים תנועתיים מאלה שאינם ניידים.

מקור כוח

כמו כל מדיום תרבותי, יש בו אלמנטים המספקים את חומרי התזונה הנחוצים כך שיוכלו להתפתח מיקרואורגניזמים לא תובעניים. אלמנטים אלה מיוצגים על ידי פפטונים וטריפטין.

התפתחות המיקרואורגניזם במדיום חיונית בכדי להיות מסוגלת לראות את נוכחותם או היעדרם של המאפיינים שמעריך מדיום זה.

ייצור מימן גופרתי

האות S של ראשי התיבות SIM מתייחסת לייצור מימן גופרתי (H ₂ S). חיידקים המסוגלים להיווצר מימן גופרתי יופקו את הגופרית מ נתרן תיוסולפט.

ברגע שנוצר ה- H ₂ S - גז חסר צבע, הוא מגיב עם מלח הברזל הקיים במדיום ויוצר גופרתי ברזלי, הנראה בבירור (משקע שחור). חיידקים שאינם יוצרים H ₂ S, משאירים את המדיום של הצבע המקורי (בז ').

נוכחות המשקעים השחורים יכולה לעכב את פרשנות התנועה. עם זאת, ידועים מרבית Enterobacteriaceae המייצרים H ₂ S כנועים חיוביים כמו סלמונלה, חלבון וסיטרובקטר. יתר על כן, המשקעים השחורים המכסים כמעט את כל המדיום מרמזים על תנועתיות חיובית.

היווצרות אינדול

האות השנייה של ראשי התיבות SIM היא "אני", המייצג את היווצרות האינדול.

במובן זה, טריפטין, בנוסף להיותו מקור לחומר מזין, ממלא תפקיד אחר בסיסי. פפטון זה עשיר בחומצה אמינית הנקראת טריפטופן, לכן הוא יכול להראות חיידקים המייצרים טריפטופן.

אנזים זה אחראי על פילוק חומצת האמינו טריפטופן, עם היווצרותם של אינדול (חומר חסר צבע), חומצה פירובית ואמוניום.

זו הסיבה, כדי להציג תגובה זו, יש צורך להוסיף חומר חושפני (המגיב של ארליך או המגיב של קובץ '). שניהם מגיבים עם אינדול ויוצרים חומר בצורת טבעת אדומה-פוקסיה על פני האגר. אם מופיעה טבעת הפוקסיה, מבחן האינדוק מתפרש כחיובי.

חיידקים שאינם בעלי אנזים זה לא יהוו את הטבעת והיא מתפרשת כמבחן אינדול שלילי.

חשוב לציין שבדיקת האינול צריכה להיות האחרונה שמתפרשת, מכיוון שברגע הוספת המגיב, המדיום הופך להיות מעונן, מה שמקשה על ראיית התנועתיות.

כּוֹשֵׁר תְנוּעָה

לבסוף האות "M" של המילה SIM פירושה תנועה. על מנת להעריך תנועתיות, המדיום הזה הוא חצי מוצק אסטרטגי, מאחר ומאפיין זה חיוני בכדי להיות מסוגל לראות אם יש תנועה של חיידקים או לא. חיידקים שיש להם סמלונים הם אלו הנותנים מבחן חיובי זה.

מבחן חיובי יתבטא כאשר נצפות עכירות, הן בחיסון הראשוני והן סביבו. ואילו חיידקים לא-מובילים מתפתחים רק בדרך של החיסון הראשוני.

הכנה

סים בינוני

שוקלים 30 גרם מהמדיום המיובש וממיסים בליטר מים מזוקקים. התערובת נותנת לעמוד למשך 5 דקות ואז מחממת לרתיחה, תוך ערבוב תדיר עד להמסה מוחלטת.

מחלקים את התערובת בצינורות המבחן עם כובעי הכותנה והחיטוי החום בטמפרטורה של 121 מעלות למשך 15 דקות. הסר את מתלה הצינור מהאוטומב ואפשר לו להתמצק במצב אנכי, כך שהמדיום יהיה בצורת גוש.

לשמירתו הוא מוחזק במקרר עד לשימושו. המדיום המוכן חייב להיות בעל pH סופי של 7.3 ± 0.2.

בזמן החיסון, המדיום חייב להיות בטמפרטורת החדר. הצבע האמצעי בז '.

המגיב של קובץ '

מדדו 150 מ"ל אמיל או איזו-אמיל או אלכוהול בוטיל. (השתמש באחד מהשלושה שהוזכרו).

ממיסים 10 גר 'p-dimethylaminobenzaldehyde. ואז להוסיף באטיות 50 מ"ל של חומצה הידרוכלורית מרוכזת.

המגיב המוכן לשימוש הוא חסר צבע או צהוב בהיר. יש לשמור אותו בבקבוק ענבר ולאחסן במקרר. אין להשתמש אם הוא הופך לחום כהה; זה מצביע על כך שהוא פגום. עדיף מגיב זה בכל הנוגע ל- Enterobacteriaceae.

המגיב של ארליך

שקלו 2 גרם של p-dimethylaminobenzaldehyde והמסו 190 מ"ל של אלכוהול אתילי מוחלט וערבבו באטיות עם 40 מ"ל של חומצה הידרוכלורית מרוכזת. יש לאחסן באותה צורה של המגיב של קובץ '. המגיב של ארליך משמש לרוב לחיידקים שאינם תוססים ואנאירוביים.

יישומים

מדיום ה- SIM משמש מאוד במעבדות חיידקים. היתרון שלו הוא שניתן לצפות בשלושה מאפיינים חיוניים באותה צינור בזיהוי של Enterobacteriaceae.

זָרוּעַ

הדרך הנכונה לזרוע מדיום זה היא באמצעות המחט, איתה נלקח חלק מהמושבה הטהורה הנלמדת ומוכנס אנכית למרכז המדיום. יש לבצע נגיעה בודדת. הניקוב לא צריך להגיע לתחתית הצינור, הדבר הנכון הוא לכסות רק שני שליש מהעומק.

לא מומלץ לחזור על החיסון, מכיוון שזה יכול להוביל לפרשנויות כוזבות של תנועתיות חיובית. המדיום המחוסן מודגר בצורה אירובית ב 37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות.

לאחר שהגיע הזמן לסיום, ניתן לראות אם הייתה ייצור של H ₂ S או לא, וקריאת התנועתיות. לבסוף נחשף האינול, מוסיף 3 עד 4 טיפות של המגיב של ארליך או קובץ ', מערבבים בעדינות ומפרש.

מקור: Koneman E, אלן S, ג'נדה W, שרקנברגר P, Winn W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. מהדורה חמישית עריכה Panamericana SA ארגנטינה.

QA

כבקרת סטריליות, צינורות אחד או שניים מודגרים ללא חיסון בתנור בחום של 37 מעלות למשך 24 שעות. זה צפוי שלאחר זמן זה לא יחול שינוי או צבע.

כבקרת איכות, ניתן להשתמש בזנים מאושרים ידועים כמו: Escherichia coli ATCC 25922, Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella sonnei ATCC 29930, Proteus vulgaris ATCC 13315.

התוצאות הצפויות הן: Escherichia coli H ₂ S שלילי, תנועה אינדול וחיובית, Enterobacter aerogenes רק תנועה חיובית, Salmonella typhimurium H ₂ S ותנועתיות חיובית, עם אינדול שלילי. Proteus vulgaris כולם חיוביים, בעוד Klebsiella pneumoniae ו- Shigella כולם שליליים.

מגבלות

-זנים מסוימים של Morganella morganii, בין זנים אחרים, יכולים לייצר פיגמנט חום בגוון זה בגלל ייצור המלנין, אין להתבלבל עם המשקעים של גופרית ברזלית. אצל אנשי מקצוע חסרי ניסיון מצב זה יכול ליצור חיובי כוזב בפרשנות מבחן H ₂ S.

-חיידקים אירוביים קפדניים יגדלו רק על פני הצינור, דבר שיקשה על פרשנות תנועתיות.

הפניות

1. מעבדות BD. BBL סים בינוני. 2008. זמין ב: bd.com
2. מעבדות Neogen. סים בינוני. ניתן להשיג ב: מזון בטוח
3. דיפקו פרנסיסקו סוריה מלגיזו. סים בינוני. 2009. זמין בכתובת: http://f-soria.es
4. מעבדת בריזואלה. סים בינוני. ניתן להשיג ב: .brizuela-lab.com
5. מעבדות בריטניה. סים בינוני. 2015. ניתן להשיג ב: studyres.es/doc
6. Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. מהדורה חמישית עריכה Panamericana SA ארגנטינה.