תרבות חיידקים: סוגים, מאפיינים, שיטות, דרישות - ביולוגיה - 2025

תרבית חיידקים היא התוצאה של הזריעה של מיקרואורגניזמים אלה על תקשורת תזונתית, כדי שתוכל להתרבות, וכתוצאה מכך את המראה של מושבות חיידקים בתקשורת מוצקה העננות בתקשורת נוזלית.

שיטת הזריעה חשובה מאוד בכדי להיות מסוגלת להפיץ את החיסון בצורה כזו שהחיידקים הקיימים מתפזרים ויכולים לפתח מושבות מבודדות כראוי.

גידולים שונים שנטעו על ידי הסופר במעבדה לבקטריולוגיה בבניין למדעים ביו-רפואיים וטכנולוגיים, אוניברסיטת קרבובו. מקור: הרכב התמונות שצולמו על ידי המחבר MSc. מריאלסה גיל.

המושבות המתקבלות במדיום התרבות המוצק הן תוצאה של התפשטות המיקרואורגניזם שזרע. כל מושבה מתחילה מחיידק יחיד שיכול להתרבות באופן אקספוננציאלי ליצירת אוכלוסיה גלויה מקרוסקופית.

אותו דבר מתרחש בתקשורת תרבית נוזלית אך במקרה זה נצפתה גידול בקטריאלי על ידי עכירות.

גידול חיידקי אפשרי כאשר המדיום התרבותי שנבחר עומד בתנאי התזונה וה- pH הנחוצים להתפתחות של חיידק מסוים. בנוסף, יש צורך לשלוט על משתנים אחרים, כגון טמפרטורה, זמן הדגירה, ריכוז החמצן, CO ₂ , בין היתר.

לא כל אוכלוסיות החיידקים זקוקות לאותן דרישות, אף כי חלקן עשויות להיות משותפות כמעט לכולן, כמו שהמדיום מכיל פפונים, נכון גם שיש מיקרואורגניזמים תובעניים יותר הדורשים בנוסף חומרים ספציפיים אחרים, המכונים גורמי גדילה.

לדוגמא, ניתן להזכיר שחלק מההמופילוס זקוקים לנוכחות גורם X (חמין) וגורם V (NAD) כדי לגדול.

סוגי תרבויות חיידקים

תרבויות חיידקים יכולות להיות פולימיקרוביאליות, טהורות או מעורבות.

תרביות חיידקים פולימיקרוביאליות

תרבויות פולימיקרוביאליות הן אלה שמקורן בזריעת דגימה המתקבלת ממקום שיש בו מיקרוביוטה רגילה, בה ניתן למצוא גם פתוגן מסוים.

דוגמא: בעת פיתוח תרבית ספוגית גרון, יתכן כי יתגלה מחלה כמו סטרפטוקוקוס פיוגנים, אך זה ילווה על ידי מיקרוביוטה נפוצה באזור.

במקרה זה, הפשטה טובה חיונית בכדי לאפשר גידול של סוגים שונים של חיידקים שנמצאים בבידוד.

המושבה שיש לה מאפיינים התואמים זן סטרפטוקוקוס פיוגנים תיגע בקפידה עם לולאת הפלטינה ואז תשתול במדיום תרבות בתולי וכך תקבל תרבות טהורה של אותו מיקרואורגניזם.

מתרבות טהורה זו ניתן לבצע את כל הבדיקות הנדרשות לזיהוי החיידקים.

תרבית חיידקים טהורה

על מנת לזהות ביעילות מיקרואורגניזם יש לעבוד מתרבות טהורה.

ניתן להשיג תרבויות טהורות כמו במקרה של הדוגמה הקודמת על ידי שתילה מחדש של מושבה מבודדת של תרבות פולימיקרוביאלית, או כאשר נטוע דגימה שמגיעה ממקום סטרילי בדרך כלל ורק פתוגן אחד קיים (גידול של יחיד סוג של חיידקים). דוגמא: כאשר זרע של CSF מזרע מטופל עם דלקת קרום המוח בקטריאלית.

דרך נוספת היא כששוחרים מחדש מתרבות טהורה ותיקה לקבלת תרבות טהורה מחודשת.

תרבויות חיידקים מעורבות

תרבויות אלה מורכבות מתערובת של מיקרואורגניזמים, כפי שהן מופיעות בטבע. בחלק מהתהליכים התעשייתיים השימוש בתרבויות מעורבות הוא נוח.

ניתן להשיג אותו באמצעות איחוד של כמה תרבויות טהורות, מכיוון שאלו מאפשרים לימוד יחסי גומלין בין חיידקים.

הם מועילים, למשל, להשפלת זן-ביוטיות בשפכים תעשייתיים, מכיוון שהם פועלים כסוכנים מתכלים.

מאפייני תרבויות חיידקים

המאפיינים המורפולוגיים של המושבות המתקבלות בתרביות חיידקים יכולים להיות מגוונים מאוד.

מושבות יכולות להיות קטנות מאוד, בינוניות או גדולות ועשויות להופיע יבשות או מלוחות, מבריקות או משעממות. בהתאם למרקם זה יכול להשתנות בין חלק למחוספס, ובהתאם לצורה, הם יכולים להיות עגולים, שטוחים וקמורים.

בהתאם לצבע הם יכולים להיות: חסרי צבע, לבן, צהוב, ורוד, פוקסיה, אדום, כתום, בז ', אפרפר, ירקרק, חום, שחור או עם ברק מתכתי, תלוי בחיידקים המעורבים ובמדיום התרבות המשמש.

גבולות המושבות יכולות להיות רגילות או לא סדירות. אחרים, לעומת זאת, עשויים להציג סרט אחיד שמופץ כמעט בכל המדיום המכונה "נחיל". זה מאפיין את Proteus sp.

יש תרבויות חיידקים הפולטות ריחות האופייניים למדי למינים המעורבים. לדוגמא, לתרבות של Pseudomonas aeruginosa יש ריח פרי אופייני, ואילו לסוג פרוטאוס יש ריח מגונה מבחינה אופיינית.

דוגמאות למושבות לפי גודלן

קטן במיוחד: Mycoplasma pneumoniae, Francisella tularensis.

קטן: Streptococcus sp, Enterococcus sp.

בינוני: Enterobacteriaceae משפחתי

גדול: Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa.

דוגמה למושבות לפי מראהן

יבש: ​​Lactobacillus confusus.

מוחצרידים: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

מבריק: Klebsiella pneumoniae.

אטום: Enterococcus faecalis, כמה זנים של Neisseria gonorrhoeae.

דוגמאות למושבות לפי מרקם

מושבות חלקות: Micrococcus luteus

מושבות גסות: סרסינה ventriculi על אגר מזין.

דוגמה למושבות לפי צורתן

חוזרים: Listeria murrayi ו- Micrococcus luteus על אגר מזין.

שטוח: Staphylococcus equorum על אגר מזין.

קמור: Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae.

דוגמה למושבות לפי גבולותיהן

קצה מעוגל: Staphylococcus aureus, Escherichia coli.

גבול לא סדיר: Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa.

קצוות מעוגלים: Bacillus sp.

דוגמה למושבות לפי צבען

שקוף או חסר צבע: Shigella sp על אגר XLD.

לבן: Staphylococcus hominis על אגר הדם.

בז ': Bacillus sphaericus ו- Lactobacillus confusus על אגר מזין.

צהוב: Staphylococcus aureus ו- Elizabethkingia meningoseptica על אגר דם, Pediococcus sp, Staphylococcus lentus על אגר מזין,

ורוד: Escherichia coli על אגר XLD, Micrococcus roseus על אגר מזין.

פוקסיה: Escherichia coli על אגר מק קונקי.

סגול: Chromobacterium violaceum.

אדמדם: Serratia מורססנס בטמפרטורת החדר על אגר מזין.

תפוז: Kurthia zopfii על אגר מזין.

אפרפר: Sporosarcina ureae באגר תמצית אדמה.

ירקרק: Pseudomonas aeruginosa על אגר BHI.

חום: Enterococcus sp על אגר מרה אסקולין.

שחור: סלמונלה enteritidis על אגר SS.

עם ברק מתכתי: Escherichia coli על אנדו אגר.

שיטות תרבות חיידקית

תרבות חיידקים אירובית או אנאירובית

זוהי שיטת הטיפוח הנפוצה ביותר. זה נובע מהעובדה כי מלכתחילה, מרבית החיידקים הפתוגניים לאדם הם אנאירוב אירובי או פקולטטיבי; ושנית, זה הרבה יותר זול וקל יותר מתרבויות אנאירוביות. דוגמה: Mycoplasma pneumoniae ו- Escherichia coli בהתאמה.

תרבית חיידקים אנאירובית

תרבות מסוג זה מצריכה דיכוי חמצן מוחלט. אמצעי תרבות לחיידקים אנאירוביים צריכים בדרך כלל להכיל חומרים מפחיתים כגון: חומצה אסקורבית, תיוגיקולאט, ציסטאין או גופרית על מנת לחסל את ההשפעות הרעילות של חמצן מוטס.

חלקם מכילים אינדיקטורים כמו resazurin שהוא כחול בנוכחות חמצן וחסר צבע באנאירוביוזה. דוגמה: Clostridium tetani.

תרבות חיידקית במיקרואירופיליה

לוחיות התרבות מונחות במכסה המנוע המיקרואירופילי עם נר דולק, מכוסה. הנר צורך את החמצן וכבה. במצב זה, כמה חיידקים צומחים, כגון Streptococcus sp.

חומרים ודרישות

חומרים

החומרים הנדרשים לביצוע תרבות חיידקים הם: כלים או צינורות פטרי עם חומרי מדיה או מרק, לולאת פלטינה, מדגם, מבער בונסן או תנור.

דרישות לביצוע תרבות חיידקים

תרבית של חיידקים דורשת יסודות רבים שיש לקחת בחשבון, כמו חומרים מזינים במדיום, pH, טמפרטורה, ריכוז חמצן, CO2, לחות, בין היתר.

תזונה

תרבויות בקטריאליות דורשות מדיה תרבותית המכילה מקרואמנטים ומיקרו-אלמנטים. בין המקרו-רכיבים ניתן להזכיר חומרים אורגניים כמו פפטונים, חומצות אמינו, פחמימות כמקורות לפחמן וחנקן.

בין המיקרו-אלמנטים ניתן למצוא חומרים אנאורגניים או יסודות קורט מנגן, אבץ, ניקל, בורון, כלור, סלניום, סיליקון, קובלט, נחושת, בין היתר.

ריכוז יון מימן (pH)

חשיבות חיונית לריכוז יוני מימן (H ⁺ ) ויוני הידרוקסיל (OH ^- ) במדיום בו תתפתח התרבות, מכיוון שאלו קובעים את רמת החומציות.

ה- pH הנפוץ ביותר הוא נייטרלי (pH = 7.0), עם זאת יתכנו אמצעים שבהם pH חומצי או אלקליין נוח, למשל אם תרצו לבודד חיידק אסידופילי או אלקליפילי בהתאמה.

טֶמפֶּרָטוּרָה

הטמפרטורה היא גורם חשוב מאוד המשפיע על גידול תרבויות החיידקים. חיידקים יכולים להיות פסיכו-פרופיליים (גדלים בטמפרטורות <20 מעלות צלזיוס, מזופיליים (בין 20 ° C ל- 42 מעלות צלזיוס)), תרמופיליים (40-70 מעלות צלזיוס), היפרתרמופיליים (70 מעלות צלזיוס -105 מעלות צלזיוס).

דרישת חמצן

אירובי: הם צומחים בנוכחות חמצן.

מיקרואירופיליות: הן גדלות בנוכחות CO 5 5% _.

אנאירובים קפדניים: גדל בהיעדר חמצן.

אנאירובים פקולטטיביים: גדל בנוכחות חמצן או בלעדיו.

אוויר-סובלני: הם צומחים היטב ללא חמצן וסובלים מעט חמצן.

מדיה תרבותית

מדיה תרבותית היא תכשירים תזונתיים מיוחדים המוכנים במעבדה להשגת צמיחה או תרבות מיקרוביאלית. אמצעי מדיה אלה משתנים עקביות, הרכב ותפקוד. כל מעבדה תכין את סוג המדיום התרבותי המתאים לצרכיהם.

אוסף תרבות חיידקים

ישנם מוסדות או ארגונים המוקדשים לאיסוף, אפיון, תחזוקה והפצה של זני חיידקים בעלי חשיבות קלינית, סביבתית או תעשייתית.

זנים אלה משמשים לעבודות מחקר ולבקרת איכות של מדיות תרבות.

דוגמא: הזנים אוסף תרבות הסוג האמריקנית, המרכז הוונצואלי לאיסוף מיקרואורגניזמים (CVCM) וזנים של המכון הלאומי להיגיינה, אפידמיולוגיה ומיקרוביולוגיה של קובה (INHEM).

הפניות

1. Benavides G, Hermida A. בידוד וזיהוי של צמחיית חיידקים ילידים מאדמת קרוז ורדה וגוואסה פאמרוס. (קונדינמרקה). 2008. בוגוטה. ניתן להשיג ב: javeriana.edu.co/biblos
2. האנס ס. מיקרוביולוגיה כללית. מהדורות אומגה. 1991. ברצלונה, ספרד. ניתן להשיג ב: biolprocariotas.files
3. Weng Z, Junco R, Díaz R. אוסף תרבויות חיידקים: הערות על התפתחותן. הכומר קובאנה היג אפידמיול, 2003; 41 (1). ניתן להשיג ב: scielo.sld.cu/scielo.
4. Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. מהדורה חמישית עריכה Panamericana SA ארגנטינה.
5. פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. עריכה Panamericana SA ארגנטינה.