סלניט הוא מדיום תרבות נוזל סלקטיבית. הוא תוכנן על ידי לייפסון לצורך העשרת הדגימות בהן יש חשד לנוכחות חיידקים enteropathogenic של הסוג סלמונלה.
מדיום זה תואם את הדרישות של איגוד הבריאות הציבורי האמריקני (APHA), ולכן הוא מקובל לבדיקת נוכחותה של סלמונלה בדגימות של צואה, שתן, אוכל נוזלי או מוצק, מים, בין היתר.
מרק סלניט. מקור: תמונה שצולמה על ידי הסופר MSc. מריאלסה גיל
ההרכב הכימי שלה מעדיף את התאוששותם של מיקרואורגניזמים אלה ובתורם מעכב את הצמיחה של אחרים. זה רעיל בעיקר למרבית החיידקים השייכים למשפחת Enterobacteriaceae. עם זאת, זה גם מאפשר התאוששות של זני שיגלה ואינו מעכב את צמיחתם של Pseudomonas ו- Proteus.
זה מורכב מסלניט מימן נתרן נטול מים, נתרן פוספט נטול מים, פפונים ולקטוז. יש גם גרסה שאליה מתווספים ציסטין, ומכאן שמה מרק סלניט-ציסטין.
נכון לעכשיו, עדיף להשתמש במרק סלניט-ציסטין מאחר ומתקבל אחוז גבוה יותר של התאוששות סלמונלה, שווה ערך לזה שנצפה במדיה סלקטיבית אחרת לאותה מטרה, כמו מרק נתרן טטרתיונאט.
בָּסִיס
הפפטונים הכלולים במרק משמשים כחומרים תזונתיים להתפתחות תקינה של מיקרואורגניזמים. זני סלמונלה משתמשים בפפטונים כמקור לחנקן, ויטמינים וחומצות אמינו.
לקטוז הוא הפחמימה הניתנת לתסיסה, ואילו נתרן סלניט הוא החומר המעכב שעוצר את צמיחתם של חיידקי Gram חיוביים ורוב החיידקים המצויים בפלורת המעיים, ובמיוחד אלה ממשפחת Enterobacteriaceae. נתרן פוספט הוא החוצץ המייצב את רמת החומציות של המדיום.
במקרה של גרסת מרק הסלנית המכילה L-cystine, תרכובת נוספת זו היא חומר מקטין הממעיט את רעילות הסלנית, ומגביר את התאוששות סלמונלה.
הכנה
מרק סלניט
אם ברשותכם מרכיבי התערובת, תוכלו לשקול:
4 גרם סלניט מים נתרן מימן.
10 גרם נתרן פוספט נטול מים.
5 גרם פפטונים.
4 גרם לקטוז.
ממיסים את התרכובות בליטר של מים מזוקקים סטריליים. ניתן לחמם מעט להתמוסס לחלוטין.
מעבדות מסוימות חושפות את המדיום במשך 10 דקות בקיטור שוטף כדי לעקר אותו, מכיוון שלא צריך לאחזר אותו אוטומטית. אם המדיום מעוקר, ניתן לאחסן אותו במקרר עד לשימוש.
ניתן להכין אותו גם ללא סטרילי ולהגיש ישירות 10 עד 15 מ"ל לתוך מבחנות סטריליות.
במקרה זה יש להשאיר לנוח ולהשתמש בו באופן מיידי. מכיוון שהמדיום אינו סטרילי, לא ניתן לאחסן אותו במקרר לשימוש מאוחר יותר.
- הכנת הסביבה המסחרית
אם המדיום המסחרי זמין, שקלו 23 גרם מהמדיום המיובש והמיסו אותו בליטר אחד של מים מזוקקים סטריליים. מחממים לזמן קצר להמיס. אל תחטא אוטומטית. מגישים בצורה אספטית 10 או 15 מ"ל במבחנות סטריליות.
ה- pH הסופי של המדיום צריך להיות 7.0 ± 0.2.
יש לציין כי צבעו של המדיום המיובש הוא בצבע בז 'והתכשיר הוא ענבר בהיר ושקוף.
משתנה מרק סלניט-ציסטין
הוא מכיל את אותם תרכובות כמו מרק סלניט, אך מוסיפים 10 מ"ג ציסטין. שאר ההליך זהה בדיוק לתאר לעיל.
יישומים
מדיום זה מיוחד לשימוש במחקרים אפידמיולוגיים, במקרים בהם המחלה אינה בשלב החריף שלה, חולים אסימפטומטיים או נשאים בריאים.
בדרך כלל קשה בידוד של הסוג סלמונלה, מכיוון שהם בדרך כלל רק מדגימים שזוהמו בצורה גרועה. בהיותו בכמויות קטנות, זה חופף בקלות על ידי גידול של ז'אנרים חיידקיים אחרים הנמצאים בכמות גדולה יותר.
לעומת זאת, חומר הגלם איתו מיוצרים מזון מעובד נחשף לרוב לחום, תהליכי התייבשות, שימוש בחומרי חיטוי, קרינה וחומרים משמרים, בין היתר.
לפיכך, הסלמונלות הקיימות בחומר הגלם אינן מתייחסות לרעה על ידי הכפפת המוצר לתהליכים התעשייתיים האמורים. באופן דומה, במקרה של דגימות קליניות כמו צואה, הזנים עשויים להיות חלשים אם הם מגיעים מחולים שטופלו באנטיביוטיקה.
לכן, יש להעשיר מראש כל דגימה בה יש חשד לנוכחות סלמונלה, ולהעשיר אותה במרק סלניט בכדי לייעל את התאוששותה בתקשורת סלקטיבית, כגון אגר SS, אגר קסילוז, ליזין deoxycholate (XLD) ), אגר Hektoen אגר (HE) ואגר ירוק בהיר, בין היתר.
זָרוּעַ
עבור דגימות צואה לקחת 1 גרם מדגם ולהשליך בצינור עם 10 עד 15 מ"ל מרק סלניט. אם הצואה נוזלית, קח 1 מ"ל והשעיה במרק. עבור ספוגיות פי הטבעת, פרוק את חומר הספוג למרק.
בדגימות מזון מוצק קחו 1 גר 'והשעו במרק הסלנית.
במזון נוזלי מערבבים בחלקים שווים עם מרק הסלניט בריכוז כפול.
עבור דגימות שתן, צנטריפוגה, השליך את העל-טבעי, קח את כל המשקעים והשעה אותו במרק הסלנית.
המרקאים מודגרים ב 37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות של דגירה. עדות לגידול בקטריאלי על ידי עכירות. ניתן לכלול צינור נוסף לכל מדגם לדגירה בחום של 42 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, זריעת אמצעי אחסון סלקטיביים סלקטיביים ממרק הסלנית.
QA
כדי לשלוט על סטריליות, מרק סלניט מכל אצווה ללא חיסון מודגר ב 37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות. זה צפוי כי לא תהיה עכירות או שינוי צבע של המדיום.
ניתן להשתמש בזנים ידועים כדי לשלוט בתפקוד התקין של המדיום, כגון:
Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 ו- Proteus mirabilis ATCC 43071.
התוצאות הצפויות הן:
- בשלושת זני החיידקים הראשונים, הצמיחה חייבת להיות מספקת.
- לעיכוב חלקי של Escherichia coli.
- לצמיחה בינונית של חלבון.
מגבלות
בינוני מרק סלניום הוא רעיל לעור האדם, ולכן יש להימנע ממגע ישיר.
הפניות
- פלורס-Abuxapqui J, Puc-Franco M, Heredia-Navarrete M, Vivas-Rosel M, Franco-Monsreal J. השוואה בין מדיה תרבותית של נתרן סלניט וטטרתיונאט נתרן, שניהם מודגרים ב 37 מעלות צלזיוס ו- 42 מעלות צלזיוס הבידוד של סלמונלה spp מצואה של נשאים. רב 'ביומד 2003; 14 (4): 215-220
- מעבדות בריטניה. סלינטו ברוט. 2015. ניתן להשיג ב: britanialab.com
- מעבדות Neogen. מרק סלניט. ניתן להשיג ב: foodafety.neogen.com
- González -Pedraza J, Pereira -Sanandres N, Soto -Varela Z, Hernández -Aguirre E, Villarreal- Camacho J. בידוד מיקרוביולוגי של Salmonella spp. וכלים מולקולריים לגילויו. בריאות, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. ניתן להשיג באתר: http://www.scielo.org.
- פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. עריכה Panamericana SA ארגנטינה.