מבחנים חוצים: בשביל מה הם מיועדים, טכניקה, רציונל, שלבים - תרופה - 2025

ה- Crossmatch הם מספר מחקרים במעבדה המתקיימים בכדי לקבוע אם מוצרי דם מתורם (בעיקר דם מלא ואדום כדוריים) תואמים את הדם של המקבל.

זהו מבחן משלים נוסף לתאימות ABO ולגורם Rh. הסיבה להתלבשות צולבת היא שלפעמים שני אנשים (מקבלים תורמים) עשויים להיות באותה קבוצת ABO ו- Rh, אך עדיין דמם אינו תואם.

מקור: unsplash.com

אי התאמה כזו נובעת מנוכחות נוגדנים כנגד סדרת חלבונים של תאי דם אדומים המכונים אנטיגנים מינוריים. אנטיגנים אלה אינם נבדקים באופן שגרתי כפי שהם נוגעים לקבוצת דם (ABO) ולגורם Rh.

הסיבה לכך היא שהאנטיגנים הזעירים הם הרבה פחות שכיחים וביטוי משתנה אצל כל פרט, ולכן כמעט בלתי אפשרי לקבץ אותם לקטגוריות כפי שהוא נעשה עם הקבוצה וגורם Rh.

במקום זאת, תאים אדומים תורמים מעורבבים עם סרום המטופל (בדיקת התאמה ראשית) ותאים אדומים של חולים עם סרום תורם (בדיקת התאמה מינורית) כדי לאתר נוכחות של תגובות נוגדן נוגדנים.

כאשר ישנם נוגדנים כנגד אנטיגנים מינוריים, בסרום של המטופל או בתורם, אומרים שהבדיקה חיובית, כך שברוב המקרים לא ניתן להעביר את יחידת הדם הספציפית.

קבוצת ABO

כדי להבין באופן מלא על מה התגובות ההצלבות, עליכם לדעת תחילה את היסודות של קבוצות דם.

במובן זה, הדבר החשוב ביותר הוא לדעת שניתן לסווג את הדם לארבע קבוצות: A, B, AB ו- O.

כל אחת מהקבוצות הללו מבטאת חלבון מסוים (אנטיגן) על פני כדוריות הדם האדומות, המזוהה כאלמנט זר על ידי הנוגדנים של קולטן פוטנציאלי בקבוצה שונה.

הדבר הבולט ביותר בתגובות נוגדן-נוגדנים בהתאמת דם הוא שלא נדרשת חשיפה מוקדמת לאנטיגן כדי להתקיים נוגדנים. זה ידוע כנוגדנים טבעיים.

נוגדנים טבעיים

באופן כללי, על מנת שנוגדנים יתקיימו בגופו של אדם, יש צורך שתאי הדם הלבנים של האדם ייחשפו בעבר לאנטיגן.

המשמעות היא שבמגע הראשון בין האנטיגן הזר לאורגניזם אין נוגדנים, מכיוון שאלו נוצרים בהמשך, לאחר המגע הראשוני. לכן אי אפשר שלמערכת החיסון נוגדנים כנגד נגיף מסוים למשל, אם לא נחשף אליו בעבר.

החריג היחיד לאמור לעיל הוא אנטיגנים נגד AB. במקרים אלה, לאדם יש נוגדנים כנגד אנטיגן שאין בתאי הדם האדומים שלהם, למרות שמעולם לא היו בקשר עם תאי הדם האדומים של אדם אחר. זה ידוע כנוגדנים טבעיים.

אנטיגנים ונוגדנים הקשורים לקבוצת הדם

קבוצות הדם נקבעות במקרה של מערכת ABO על ידי הימצאות אנטיגנים ספציפיים (A או B) על קרום תאי הדם האדומים, ובניגוד לכך, נוגדנים כנגד האנטיגן הנעדר בממברנה האריתוציטית.

כך, אדם עם קבוצת דם A מבטא אנטיגן A על פני כדוריות הדם האדומות שלו, בעוד שיש נוגדנים נגד B בסרום.

נהפוך הוא, בקרב חולי קבוצה B הנוגדן B נמצא בעוד שהנוגדנים הם אנטי A.

עם זאת, לחולים עם דם AB יש אנטיגנים A ו- B. לכן, אין נוגדנים שכן פעולה זו תשמיד את כדוריות הדם האדומות של אותו אדם.

להפך, מתרחשת בקבוצה O, בה ממברנה האריתיתוציט אינה מציגה אף אחד משני האנטיגנים (לא A ולא B), בעוד שבסרום ישנם נוגדנים נגד A ואנטי B.

אי התאמה קבוצתית של ABO

מהאמור לעיל, ניתן להסיק בקלות את התאימות של קבוצות דם ABO, מכיוון שהכרת האנטיגן של קרום אריתרוציט מכיר אוטומטית את הנוגדנים בסרום. אז זה:

- דם A תואם לקבוצה A ולקבוצה O.

- קבוצת דם B תואמת את הדם B ו- O.

- אנשים עם קבוצה O יכולים לקבל רק דם O (מכיוון שיש להם נוגדנים נגד A ואנטי B), אם כי הדם שלהם מתקבל על ידי כל הקבוצות האחרות ללא בעיות מכיוון שהוא חסר אנטיגנים.

- סוף סוף. אלה שיש להם קבוצת דם AB יכולים לקבל דם מכל הקבוצות האחרות (A, B, O וכמובן AB), מכיוון שאין להם נוגדנים נגד אף אחד מהאנטיגנים. עם זאת, רק אנשים בקבוצה AB יכולים לקבל דם AB, שכן לכל הקבוצות האחרות יש נוגדנים אשר יהרסו את תאי הדם האדומים הללו.

אנטיגנים מינוריים

בדומה לקבוצות ABO, ניתן למצוא סדרה של חלבונים על פני השטח של אריתרוציטים המתפקדים כאנטיגנים באותו אופן כמו אנטיגנים בקבוצת ABO.

עם זאת, אנטיגנים אלה אינם קיימים אצל כל האנשים. השילוב שלהם הטרוגני והחדירה (רמת ביטוי החלבון) משתנה, ולכן סיווג לקבוצות כמו זו שקיימת עבור ABO ו- Rh הוא בלתי אפשרי. זה המקום בו הוא שואב את שמו מ" אנטיגנים מינוריים ", המכונה גם" אנטיגנים שכיחות נמוכה ".

למרות שהם אינם שכיחים, יתכנו נוגדנים טבעיים נגד אנטיגנים מינוריים. ביניהם הנפוצים ביותר הם לואיס, MNSs, אנטי N, קל, דאפי, אנטי פיוב וקיד. כולם אחראים לתגובות המוליטיות ורציניות לאחר עירוי.

בנוסף יכול להיות מקרה של רגישות כנגד אנטיגנים מינוריים על ידי מגע קודם, אם עם חלבונים אנטיגניים כאמור עקב עירויים קודמים או בגלל חסינות נגדית.

חוצה חסינות

נאמר שקיימת חסינות נגד, כאשר שני אנטיגנים משני מקורות שונים (למשל תא דם אדום וחיידק) דומים מאוד, עד כדי כך שהנוגדנים כנגד אחד מאותם חלבונים אנטיגנים מגיבים גם הם עם השני מכיוון שהם כמעט זהים .

כדי להבין זאת טוב יותר, קח את הדוגמא ההיפותטית הקודמת (אנטיגנים מתא כדור דם וחיידק). בשני המקרים אין נוגדנים טבעיים, אך אם אדם נחשף לחיידקים הם ייצרו כנגדן נוגדנים.

נוגדנים כאלה יגיבו בהמשך ככדוריות דם אדומות אם האנטיגנים שלה דומים מאוד לאלה של החיידקים שהניבו את הנוגדנים להיווצרותם.

אם זה קורה, לא ניתן לתת את כדוריות הדם האדומות עם אותו חלבון אנטיגני לאדם שיש לו את הנוגדנים, שכן תהיה דחייה. כאן טמונה החשיבות של תגובות צולבות.

בשביל מה מתלבש צולב?

מכיוון שאי אפשר לקבץ את הדם של אנשים שונים על סמך האנטיגנים הזעירים, הדרך היחידה לדעת אם יש נוגדנים כנגד האנטיגנים הזעירים של כדוריות הדם האדומות של אדם אחר בדם של אדם אחד היא באמצעות איסור צולב. .

במקרים בהם קיימים נוגדנים, מופעלת תגובת המוליזה או אגרגינציה, וזו הסיבה שמסקנה כי התגובה הייתה חיובית; כלומר ישנם נוגדנים כנגד אנטיגנים מינוריים (אם כי לא ידוע בדיוק איזה מהם). אחרת הבדיקה שלילית.

בָּסִיס

תלבושות צולבות מבוססות על תגובת הנוגדן-נוגדן. לכן איתם ניתן לגלות האם בסרום של נמען יש נוגדנים כנגד אנטיגנים של תאי הדם האדומים של התורם (או להפך), מה שמשרה תגובה של נוגדן נוגדן.

אם אין נוגדנים, לא מתרחשת תגובה והבדיקה מדווחת כשלילית. נהפוך הוא, אם התגובה חיובית (יש המוליזה או אגרנות במהלך הבדיקה) ניתן להסיק כי הנוגדנים קיימים.

במובן זה חשוב לציין כי יתכנו נוגדנים כנגד תאי דם אדומים בסרום של התורם וגם של הנמען. זו הסיבה שישנם שני סוגים של תגובות צולבות.

סוגים של תגובות צולבות

נוגדנים נגד אריתרוציטים תורמים עשויים להתקיים בסרום של המטופל; אך ההפך יכול להתרחש, כלומר נוגדנים בסרום התורם כנגד תאי הדם האדומים של המטופל.

זו הסיבה שיש שני סוגים של צולבות:

- crossmatch גדול.

- צלב קטן.

שני הסוגים מבוצעים באופן שגרתי בבנק הדם לפני עירוי של מוצרי דם, שכן אם אחת מהבדיקות חיוביות קיים סיכון גבוה לתגובות עירוי העלולות לסכן את חיי המטופל.

מזוודה גדולה

בדיקה זו מעריכה האם סרום הנמען מכיל נוגדנים לתאי הדם האדומים של התורם.

אם זה קורה, לא ניתן להעניק מוצרי דם, מכיוון שכמות גדולה של נוגדנים הקיימים בפלזמה של המטופל יהרסו את תאי הדם האדומים של התורם במהירות רבה, ויוצרים תגובות קטסטרופליות בגופו של הנמען בתהליך. התגובות הללו כה חמורות עד שהן עלולות לסכן חיים.

צולב קל

במקרה זה, נקבע האם ישנם נוגדנים כנגד תאי הדם האדומים של המקבל בסרום התורם.

אם כן, הנוגדנים יתחילו להרוס את האריתתרוציטים של הנמען. עם זאת, בהתחשב בכך שכמות הנוגדנים מוגבלת, התגובה פחות אינטנסיבית; למרות שזה עדיין מסוכן.

שלבים

התלבושת הצלב העיקרית וגם המשנית מחולקת לשלושה שלבים:

- מלח.

- תרמית או דגירה.

- קומבס.

בשלב הראשון תאי הדם האדומים והסרום מעורבבים בתמיסת מלח. בהמשך, אלבומין מתווסף, והדגימה מודגרת בחום של 37 מעלות למשך 30 דקות כדי להמשיך סוף סוף לשלב הקומבים.

טֶכנִיקָה

טכניקת ה- crossmatch יחסית פשוטה, מכיוון שהיא כוללת הוספת תאי דם אדומים תורמים לסרום של המטופל (מוצלב צולב עיקרי) כמו גם אריתרוציטים המקבלים לסרום התורם (Crossmatch מינורי).

על מנת לגרום לתגובת הנוגדן-נוגדן בזמן קצר יחסית, יש לבצע סדרה של צעדים סטנדרטיים. שלבים אלה מסוכמים בצורה מפושטת להלן.

חשוב לציין כי החלק הבא מתאר את מבחן התאימות העיקרי, אם כי הצעדים זהים לבדיקת התאימות הקלה, אך מחליפים את מקור תאי הדם האדומים והסרום.

שלב מלח

- הוסף לצינור המבחן 2 טיפות סרום מהנמען (מהתורם אם מדובר במערך הצלב הקטין).

- קח דגימה של כדוריות דם אדומות מהתורם (מהמקבל אם מדובר במערך הצלב הקטין).

- שטפו את תאי הדם האדומים וצנטריפגו אותם.

- להחליף מחדש בתמיסה בין 3% ל- 5%.

- הניחו טיפה של תמיסה זו בצינור המכיל את סרום הנמען.

- מערבבים בעדינות.

- צנטריפוגה.

- קרא את התוצאה במנורת התצוגה.

שלב תרמי

- הוסף 2 טיפות של 22% אלבומין לצינור בו הושלם שלב המלח.

- דגירה בחום של 37 מעלות למשך 30 דקות.

- צנטריפוגה למשך 15 שניות.

- קרא את התוצאה במנורת התצוגה.

שלב הקומבס

- הוצא את התאים מהצינור ושטוף אותם בתמיסת מלח.

לחסל את העל-טבעי.

- הוסף שתי טיפות של מגיב Coombs.

- מערבבים בעדינות.

- צנטריפוגה למשך 15 עד 30 שניות.

- להחזיק מחדש את התאים ולהעריך במנורת הצפייה לגבי אגרגינציה או המוליזה.

אם יש agglutination או hemolysis באחד מהשלבים, התוצאה נחשבת חיובית.

הפניות

1. Hall, TC, Pattenden, C., Hollobone, C., Pollard, C., & Dennison, AR (2013). מדיניות עירוי דם בניתוחים כלליים אלקטיביים: כיצד לייעל את יחסי ההתאמה בין חוצה להתאמה. רפואת עירויים והמטותרפיה, 40 (1), 27-31.
2. סילברגליד, AJ, וולס, RF, Hafleigh, EB, Korn, G., Kellner, JJ, & Grumet, FC (1978). בדיקת תאימות באמצעות כדוריות דם אדומות עם תווית 51C כרומיום בחולים חיוביים צולבים. עירוי, 18 (1), 8-14.
3. קולקארני, נ ', עלי, מ', האריי, פ.נ., ג'וזף, א., ומסוד, א '(2006). מערכת התאמת צלב אלקטרונית. האם יש צורך להתאים יותר באופן שגרתי טרום ניתוחי לפני הניתוח לפני ניתוחים במעי הגס? אנדוסקופיה, 38 (11), פוסטר_50.
4. Heal, JM, Blumberg, N., & Masel, D. (1987). הערכה של התאמת crossmatching, HLA ו- ABO עבור עירויי טסיות לחולים עקשן. דם, 70 (1), 23-30.
5. Arslan, Ö. (2006). צולבים אלקטרוניים. ביקורות על רפואת עירויים, 20 (1), 75-79.
6. וו, KK, Hoak, JC, Koepke, JA, and Thompson, JS (1977). בחירת תורמי טסיות דם תואמים: הערכה פרוספקטיבית של שלוש טכניקות תואמות צולבות. עירוי, 17 (6), 638-643.
7. Schonewille, H., Zijl, AMV, and Wijermans, PW (2003). חשיבות הנוגדנים נגד אנטיגנים RBC בשכיחות נמוכה בהתאמה צולבת מלאה ומקוצרת. עירוי, 43 (7), 939-944.