מיקרוסקופ שדה כהה: מאפיינים, חלקים, פונקציות - ביולוגיה - 2025

מיקרוסקופ שדה אפל הוא מכשיר אופטי מיוחד בשימוש במעבדות מסוימות. זו תוצאה של שינוי שבוצע במיקרוסקופ ברייטפילד. ניתן לבצע מיקרוסקופיה של Darkfield באמצעות תאורה טרנסארית או באמצעות תאורה אפית.

הראשון מבוסס על חסימת קרני האור המגיעות ישירות לקבל, באמצעות שימוש במכשירים המתחלפים לפני קרני האור לקבל.

מיקרוסקופ שדה אפל / טרפונמות שנראו במיקרוסקופים של שדה כהה. מקור: דיטזל 65 / ג'ודית מיקלוסי, סנדור קסאס, אן ד זורן, שרמן מק'קל, שנג יו ופטריק ל מקגר

השדה הכהה עם האור המועבר מאפשר להדגיש את המבנים, היכולת להתבונן בחלקיקים דקיקים במיוחד. מבנים נראים עם קצת שבירה או בהירות על רקע כהה.

ואילו אפקט ההארה אפי מושג עם אור מקרי או אלכסוני. במקרה זה, המיקרוסקופ חייב להיות מצויד במסנן מיוחד בצורת סהר.

עם תאורה מקרית, המבנים הנצפים מאופיינים בהצגת אפקט חזותי בתבליט גבוה. מאפיין זה מאפשר להדגיש את שולי החלקיקים התלוי.

שלא כמו מיקרוסקופיית בהירפילד, מיקרוסקופיית שדה כהה שימושית במיוחד להמחשה של ציורי קיר המכילים חלקיקים תלויים, ללא כל סוג של כתמים.

עם זאת, יש לו מספר חסרונות, כולל שלא ניתן להשתמש בהם לתכשירים יבשים או לתכשירים מוכתמים. אין לזה רזולוציה טובה. בנוסף, כדי להבטיח תמונה טובה, הצמצם המספרי של היעדים אינו יכול לחרוג מזה של הקבל.

מאפיינים

הרכב המיקרוסקופ של השדה הכהה מציג שינויים חשובים ביחס לשדה הבהיר, מכיוון שהיסודות של שתי המיקרוסקופים מנוגדים זה לזה.

ואילו בשדה הבהיר קרני האור מרוכזות כך שתעבור דרך המדגם ישירות, בשדה האפל הקורות פזורות כך שרק הקורות האלכסוניות מגיעות לדגימה. לאחר מכן מפוזרים אותם על ידי אותה מדגם, ומשדרים את התמונה לעבר המטרה.

אם היית מתמקד במגלשה ללא מדגם, היה נצפה מעגל כהה, מכיוון שללא מדגם אין מה לפזר את האור לעבר המטרה.

כדי להשיג את האפקט הרצוי בשדה הראייה, נדרש שימוש במעבים ספציפיים, כמו גם סרעפת המסייעת בשליטה על קרני האור.

בשדה ראייה שדה כהה האלמנטים או החלקיקים במתלים נראים בהירים ושבירים בזמן ששאר השדה חשוך, מה שהופך את הניגודיות המושלמת.

אם משתמשים באור אלכסוני או מקרי, מתקבלת אפקט קצה בהקלה גבוהה במבנים שנצפו.

חלקים ממיקרוסקופ השדה האפל

מקור: amazon.com

מערכת מכנית

צינור

זהו המכשיר שדרכו התמונה משתקפת ומוגדלת על ידי המטרה נעה עד שהיא מגיעה לעינית או לעיניות.

לְרַגֵשׁ

זוהי התמיכה במקום בו נמצאים היעדים השונים. היעדים אינם קבועים, ניתן להסירם. ניתן לסובב את האקדח באופן שניתן לשנות את היעד כאשר המפעיל זקוק לו.

בורג מאקרו

בורג זה משמש למיקוד הדגימה, הוא מוזז קדימה או אחורה כדי להזיז את הדגימה קרוב יותר או רחוק יותר מהמטרה, והתנועה גרוטסקית.

בורג מיקרומטר

בורג המיקרומטר מוזז קדימה או אחורה כדי להזיז את הדגימה קרוב יותר או רחוק יותר מהמטרה. הבורג המיקרומטרי משמש לתנועות עדינות מאוד או עדינות, כמעט בלתי מורגשות. זה זה שמשיג את המיקוד האולטימטיבי.

פלטה

זו התמיכה בה הדגימה מונחת על השקופית. יש לו פתח מרכזי דרכו עוברות קרני האור. כאשר מועברים ברגי המקרו והמיקרומטר, הבמה עולה או מטה, תלוי בתנועת הבורג.

המכונית

המרכבה מאפשרת לעבור את כל הדגימה במטרה. התנועות המותרות הן קדימה ואחורה ולהיפך, ומשמאל לימין ולהפך.

אוחז מלקחיים

אלה ממוקמים על הבמה, עשויים מתכת ומיועדים להחזיק את המגלשה כדי למנוע התגלגלותה בזמן התצפית. חשוב שהמדגם יישאר קבוע בזמן שהוא נצפה. המחברים בגודל מדויק לקבלת המגלשה.

זרוע או ידית

הזרוע מצטרפת אל הצינור עם הבסיס. זה המקום בו יש להחזיק את המיקרוסקופ כאשר הוא עתיד להיות מועבר מצד לצד. ביד אחת אוחזים בזרוע והבסיס מוחזק ביד השנייה.

בסיס או רגל

כשמו כן הוא, זהו הבסיס או התמיכה של המיקרוסקופ. בזכות הבסיס, המיקרוסקופ מסוגל להישאר קבוע ויציב על משטח שטוח.

מערכת אופטית

יעדים

הם בצורת גלילית. יש להם עדשה בחלק התחתון שמגדילה את התמונה שמגיעה מהמדגם. היעדים יכולים להיות בעלי הגדלות שונות. דוגמה: 4.5X (זכוכית מגדלת), 10X, 40X ו- 100X (מטרת טבילה).

מטרת הטבילה נקראת כך מכיוון שהיא מחייבת להציב כמה טיפות שמן בין המטרה לדגימה. האחרים נקראים מטרות יבשות.

היעדים מודפסים עם המאפיינים שיש להם.

דוגמא: מותג היצרן, תיקון עקמומיות שדה, תיקון סטייה, הגדלה, צמצם מספרי, תכונות אופטיות מיוחדות, בינוני טבילה, אורך הצינור, אורך המוקד, עובי החלקה הטבעת וטבעת הקוד צֶבַע.

לעדשות עדשה קדמית הממוקמת בתחתית והעדשה האחורית ממוקמת בחלקה העליון.

עיניות

מיקרוסקופים ישנים הם משקפתיים, כלומר יש להם רק עינית אחת, ומיקרוסקופים מודרניים הם משקפות, כלומר יש להם שתי עיניות.

העיניות גליליות וצורות חלולות. ישנן עדשות מתכנסות בפנים שמרחיבות את הדימוי הווירטואלי שנוצר על ידי העדשה.

העינית מצטרפת אל הצינור. זה האחרון מאפשר לתמונה המועברת על ידי המטרה להגיע לעינית, שתגדיל אותה שוב.

העינית בחלקה העליון מכילה עדשה הנקראת עינית ובחלקה התחתון היא מכילה עדשה שנקראת אספן.

יש לו גם סרעפת ובהתאם למקום הימצאו יהיה לו שם. אלה שנמצאים בין שתי העדשות נקראת עינית הויגנס ואם היא ממוקמת אחרי שתי העדשות היא נקראת עינית ראמסדן. למרות שיש הרבה אחרים.

הגדלה של העינית נע בין 5X, 10X, 15X או 20X, תלוי במיקרוסקופ.

זה דרך העינית או העיניות שהמפעיל יכול להציג את הדגימה. דגמים מסוימים מגיעים עם טבעת על העינית השמאלית הניתנת להזזה ומאפשרת התאמת תמונה. טבעת מתכווננת זו נקראת טבעת דיופטר.

-מערכת תאורה

מנורה

זהו מקור ההארה ונמצא בתחתית המיקרוסקופ. האור הוא הלוגן ונפלט מלמטה למעלה. באופן כללי, המנורה שיש למיקרוסקופים היא 12 וולט.

דִיאָפרַגמָה

לסרעפת של מיקרוסקופים שדה כהה חסר קשתית; במקרה זה, זה מונע מהקרניים המגיעות מהמנורה להגיע ישירות לדגימה, רק הקורות האלכסוניות יגעו בדגימה. הקורות המפוזרות על ידי המבנים הקיימים במדגם הן אלה שיעברו את המטרה.

זה מסביר מדוע מבנים נראים בהירים וזוהרים בשדה חשוך.

מַעֲבֶה

הקבל של מיקרוסקופ שדה כהה שונה מזה של שדה בהיר.

ישנם שני סוגים: קבלים לשבירה וקבלני השתקפות. האחרון בתורו מחולק לשתי קטגוריות: פרבולואידים וקרדיואידים.

קבלים לשבירה

סוג הקבל הזה כולל דיסק שמונח בכדי לשבור קרני אור, הוא יכול להיות ממוקם מעל העדשה הקדמית או בצד האחורי.

קל מאוד לאלתר קונדנס מסוג זה, מכיוון שמספיק להציב מול העדשה הקדמית של הקבל, דיסק העשוי מקרטון שחור הנמוך מהעדשה (הסרעפת).

ניתן להמיר מיקרוסקופ בהיר שדה בהיר למיקרוסקופ שדה אפל באמצעות קצה זה.

קבלים להשתקפות

הם אלה שמשמשים את המיקרוסקופים הסטריאוסקופיים. ישנם שני סוגים: פרבולואידים וקרדיואידים.

• פרבולואידים: יש להם סוג של עקמומיות שנקרא פרבולואידים בגלל הדמיון שלהם לפרבולה. סוג זה של קבלים נעשה שימוש נרחב בחקר עגבת, מכיוון שהוא מאפשר להתבונן בטרפונמות.
• קרדיואיד : העקמומיות של הקבל דומה ללב, ומכאן השם "קרדיואיד", הקבל הנושא את אותו השם. יש לו סרעפת הניתנת להתאמה.

מאפיינים

הוא משמש לבדיקת נוכחות של טרפונמה פלליום בדגימות קליניות.

כדאי להשתמש גם בבורליאס ולפטוספיראס.

זה אידיאלי לצפייה בהתנהגות in vivo של תאים או מיקרואורגניזמים, כל עוד אין צורך לפרט מבנים ספציפיים.

-אידיאלי להדגיש את הקפסולה או את קיר המיקרואורגניזמים.

יתרון

-מיקרוסקופי שדה חשוכים עם עיבוי שבירה זולים יותר.

השימוש בו מועיל מאוד בהגדלה של 40X.

הם אידיאליים לצפייה בדגימות עם מדד שבירה הדומה למדיום בו הם נמצאים. לדוגמא, תאים בתרבית, שמרים או חיידקים ניידים כמו ספירוצ'טים (Borrelias, Leptospiras ו- Treponemas).

ניתן לצפות בתא in vivo, המאפשר להעריך את התנהגותו. לדוגמא, תנועה בראונית, תנועה על ידי דגלים, תנועה על ידי פליטה של ​​פסאודופודים, תהליך חלוקה מיטוטית, בקיעת זחלים, ניצני שמרים, פגוציטוזיס, בין היתר.

זה מאפשר להדגיש את קצוות המבנים, למשל הקפסולה וקיר התא.

- ניתן לנתח חלקיקים מפוצלים.

-שימוש בצבעים צבעוניים אינו הכרחי.

חסרונות

יש להקפיד במיוחד בעת הרכבת התכשירים, מכיוון שאם הם עבים מדי, לא ניתן יהיה לצפות בהם היטב.

-הרזולוציה של התמונות נמוכה.

-מיקרוסקופי שדה חשוכים המשתמשים בעיבודי שבירה הם בעלי אחוז בהירות נמוך מאוד.

כדי לשפר את איכות התמונה עם מטרת טבילה (100X) יש צורך להפחית את הצמצם המספרי של היעדים וכך להגדיל את זו של החרוט המאיר. לשם כך, שילוב של דיאפרגמה נוספת שיכולה לווסת את הצמצם המספרי של המטרה היא חיונית.

אינך יכול לדמיין תכשירים יבשים, או תכשירים צבעוניים, אלא אם כן מדובר בצבעים חיוניים.

זה לא מאפשר הדמיה של מבנים מסוימים, במיוחד מבנים פנימיים.

-מיקרוסקופי שדה חשוכים יקרים יותר.

הפניות

1. "מיקרוסקופ שדה אפל." ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 26 אוגוסט 2018, 00:18 UTC. 30 ביוני 2019, 01:06
2. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. אבחון לפטוספירוזיס מדגימות דם ותרבות על ידי התבוננות במיקרוסקופ שדה חשוך. ביו-רפואי. 2008; 28 (1): 7-9. ניתן להשיג ב: scielo.org
3. Rodríguez F. סוגי מיקרוסקופים אופטיים. בלוג מעבדה קלינית וביו-רפואית. ניתן להשיג ב: franrzmn.com
4. תורמים בוויקיפדיה. מיקרוסקופית שדה אפל. ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 19 באוקטובר 2018, 00:13 UTC. ניתן להשיג ב: wikipedia.org
5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. הערכה של מיקרוסקופיות שדה אפל, תרבות וערכות סרולוגיות מסחריות באבחון לפטוספירוזיס. ההודי J Med Microbiol. 2015; 33 (3): 416-21. ניתן להשיג ב: nlm.nih.gov