בינוני קרי בלייר: רציונל, הכנה ושימושים - ביולוגיה - 2025

ממוצע קארי בלייר הוא אגר מוצק למחצה, המשמש להובלה והשימור של דגימות ביולוגיות מחסה פתוגנים במעי, מיקרואורגניזמים רָפִיף אנאירובי. כמו כל אמצעי התחבורה, תפקידו לשמור על הדגימה בתנאים אופטימליים עד לטיפוחו. המיקרואורגניזמים הפתוגניים הקיימים, כמו גם המיקרוביוטה הנלווית אליו, חייבים להישאר בר-קיימא, אך מבלי להגדיל את אוכלוסייתם.

קרי בלייר בינוני הוא תוצאה של שינוי הניסוח של מדיום הובלה של סטיוארט. השינוי בוצע בשנת 1964 וכלל החלפת מערכת ויסות החומציות (גליצרופוספט) במאגר אורגני פוספתי.

א. תרבות עם קרי בלייר בינוני. אספן שרפרפים עם קרי בלייר בינוני. מקור: A. Video Meganhow, השג תרבות פצע 2011 youtube.com B. משתמש: Mattes

הרפורמולציה הייתה הכרחית מכיוון שיוצריה הבינו כי ניתן לחילוף חומרים של גליצרופוספט לאחר זמן מסוים על ידי כמה חיידקים ספראפיטים. אלה מכפילים חופפים את הפתוגנים הקיימים.

שינויים אחרים היו חיסול כחול מתילן, וכן התאמת ה- pH לכיוון בסיסיות (pH 8.4). כל השינויים הללו שיפרו את היעילות של אמצעי התחבורה.

במקור שימש המדיום קרי בלייר לתחזוקה של פתוגנים מעיים, דוגמת שיגלה פלקסנרי, סלמונלה ספ, ויבריו כולרה וקמפילובקטר sp.

עם זאת, נצפתה לאחר מכן היעילות בשימור הכדאיות של פתוגנים תובעניים וניבים, כגון: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae וכמה אנאירובים.

בָּסִיס

קרי בלייר בינוני מכיל נתרן כלוריד, נתרן תיוגליקולאט, נודין פוספט, סידן כלוריד ואגר.

נתרן כלוריד שומר על האיזון האוסמוטי של המדיום, נתרן פוספט וסידן כלוריד מאזנים את החומציות. הנתרן מצידו, שומר על פוטנציאל הפחתת חמצון נמוך, ואילו החלק הקטן של האגר מספק את העקביות למחצה.

המדיום קרי בלייר אינו מכיל חומרים תזונתיים, מכיוון שתפקידו של אמצעי תובלה הוא לשמור על הדגימה מבלי שהיא תעבור שינויים מבחינת הלחות והעומס החיידקי; כלומר הוא נמנע מהתייבשות הדגימה תוך שמירה על הכדאיות וכמות המיקרואורגניזמים הקיימים.

לבסוף, ה- pH האלקליין מעט מונע את מותם של מיקרואורגניזמים על ידי חומציות, במיוחד ויברואים רגישים מאוד לחומצות.

הכנה

המדיום קרי בלייר זמין מסחרית כמכשיר מוכן לשימוש מיוחד. מערכת ההובלה מכוסה על ידי שקית ניילון עם אריזת פילים. בתוכו מכילה ספוגית לאיסוף הדגימה וצינור המכולה למדיום החצי מוצק של קרי בלייר.

כמו כן בשוק ישנם בתים מסחריים המספקים את המדיום המיובש להכנתו במעבדה.

לשם כך, שקלו 13.2 גרם מהמדיום המיובש והמיסו אותו בליטר אחד של מים מזוקקים. מחממים ומנערים את התכשיר עד להמסה מלאה. תפזר את המדיום בצינורות הבדיקה המכוסים בורג (בקליט).

אידוי הצינורות למשך 15 דקות. נותנים להתקרר ושומרים בטמפרטורת החדר עד לשימוש.

ניתן לאחסן מדיום קריארי בלייר ללא חיסון בצורה אופטימלית עד 18 חודשים בטמפרטורת החדר.

יש להתאים את pH של המדיום ל 8.4 ± 0.2. צבע המדיום המוכן הוא בצבע בז ', עם גמישות מסוימת.

להשתמש

סוג הדגימות

קרירי בלייר בינוני משמש כאשר לא ניתן לעבד מייד דגימות צואה, מטליות רקטליות ומטליות נרתיקיות.

כאשר אין אמצעי תחבורה זמינים, ניתן לאחסן דגימות ב -70 מעלות צלזיוס.

דְגִימָה

הספוגית ספוגה במדגם והיא מוחדרת למדיום קריארי בלייר, מבלי להגיע לתחתית.

זיהוי המדגם

על המדיום של קרי בלייר להיות בעל תווית שעליה מונחים הנתונים הבסיסיים, כגון: שם פרטי ושם משפחה של המטופל, מספר הזיהוי של הדגימה, מקור אוסף הדגימה, רופא מטפל, תאריך ושעה של האיסוף. מדגם, אבחון חזקה, טיפול אנטיביוטי.

לְהַעֲבִיר

מכוסה היטב ומועבר בטמפרטורת החדר במקרה של דגימות צואתיות. ואילו, עבור דגימות נרתיקיות בחיפוש אחר מיקרואורגניזמים אנאירוביים, מומלץ להעביר את הדגימות בגובה 4 מעלות צלזיוס.

בכל המקרים, זמן ההעברה המומלץ הוא 4-6 שעות, עם מקסימום 24 שעות.

אם יש חשד לנוכחות קמפילובקטר ג'ג'וני בדגימות צואה ולא ניתן לעבד אותם תוך 24 שעות, מומלץ לאחסן במדיום קרי בלייר ב -4 מעלות צלזיוס.

חקירות שנעשו על אמצעי התחבורה של קרי בלייר

מספר מחקרים הראו כי המדיום קרי בלייר יכול להישאר בר-קיימא למיקרואורגניזמים enteropathogenic של הסוג Shigella ו- Salmonella עד 49 יום לאחר נטילת הדגימה.

Vibrio cholerae, פתוגן מעיים חשוב נוסף, מסוגל לשרוד במשך 22 יום, ואילו ניתן להחלים לאחר Yersinia pestis (גורם סיבתי למכת בועתית ודלקת ריאות) לאחר 75 יום.

עם זאת, למרות העמידות המוכחת מבחינת התאוששותם של מיקרואורגניזמים אלה, מומלץ להעביר את הדגימות שנלקחו במדיום קרי בלייר למעבדה במהירות האפשרית.

כמו כן, ברגע שהדגימה מגיעה למעבדה, יש להזרע אותה ללא דיחוי בתקשורת התרבותית המתאימה.

מצד שני, מדיום קרי בלייר, בנוסף להיותו שימושי להובלת מיקרואורגניזמים פולטטיביים, מומלץ גם לדגימות המכילות פתוגנים אנאירוביים.

במובן זה, DeMarco ומשתפי הפעולה ערכו בשנת 2017 מחקר שכותרתו: הישרדות של מיקרואורגניזמים וגינאליים בשלוש מערכות תחבורה זמינות מסחרית.

הם הדגימו שקרי בלייר תובלה בינונית היא המדיום התחבורתי הטוב ביותר לשימור והחלמה של מיקרואורגניזמים אנאירוביים וגינאליים. באופן דומה, הם הראו ששיעור ההתאוששות הגבוה ביותר הושג כאשר טמפרטורת ההעברה הייתה 4 מעלות צלזיוס.

לפיכך, ניתן להסיק כי טמפרטורת ההובלה של ספוגים בנרתיק (מיקרואורגניזמים אנאירוביים) צריכה להיות 4 מעלות צלזיוס. בעוד שעבור דגימות צואה בחיפוש אחר מיקרואורגניזמים פקולטטיביים, הטמפרטורה האידיאלית היא טמפרטורת החדר.

QA

כדי להעריך את בקרת האיכות של מדיום ההובלה קריארי בלייר, זנים המכונים Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae ו- Campylobacter sp.

המדיום מחוסן במתח הנבחר ונשמר בטמפרטורת החדר למשך 24 שעות. לאחר מכן הם נזרעים בתקשורת התרבותית המתאימה. בכל המקרים, צפויה התאוששות מספקת של המיקרואורגניזם המדובר.

הפניות

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. הישרדות של מיקרואורגניזמים בנרתיק בשלוש מערכות הובלה זמינות מסחרית. אנרובי. 2017; 45: 44–49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. השוואה בין אמצעי השימור לאחסון דגימות צואה. J Clin Microbiol. אלף תשע מאות תשעים וחמש; 33 (8): 2176–2178.
3. דן מ, ריצ'רדסון ג'יי, מיליוטיס מיליוטיס, קורנהוף ח.ג. השוואה בין אמצעי שימור ותנאי הקפאה לאחסון דגימות של צואה. ג'יי מד מיקרוביול. 1989; 28 (2): 151-4.
4. Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. מהדורה חמישית עריכה Panamericana SA ארגנטינה.
5. פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. עריכה Panamericana SA ארגנטינה.
6. מעבדות קונדה פרונדיסה. חצי קרי בלייר. ניתן להשיג ב: condalab.com
7. מעבדת מטריקס. קרי בלייר. ניתן להשיג ב: metrixlab.mx