לולאה בקטריולוגית: מאפיינים, סוגים, שימושים - ביולוגיה

לולאת בקטריולוגית היא מכשיר עובד שמוצג מיקרוביולוגים עבור הזריעה של תרבויות חיידקים (חיידקים או פטריות). זה אולי המכשיר המשמש ביותר את אנשי המקצוע האלה.

השימוש בו נראה פשוט, אך למעשה הוא דורש אימונים רבים. לפני תחילת הזריעה, יש לעקר את הלולאה במבער Bunsen, ואז נלקח החיסון המיקרוביאלי שיכול להגיע מתרבות נוזלית או מתרבית מוצקה.

סוגי לולאות בקטריולוגיות. מקור: לא סופק מחבר קריא במכונה. おやお הנחה (בהתבסס על טענות בזכויות יוצרים).

לאחר נטילת החיסון ניתן להפקיד אותו במדיום נוזלי או לזרע אותו במדיום מוצק. לאחר כל פרוצדורה מעוקרים שוב הלולאה. הידית מתאימה גם להכנת מריחות מיקרוביאליות במגלשה.

ללולאה הבקטריולוגית שמות רבים, כולל: לולאה או לולאה מפלטינה, לולאת חיסון או לולאת זריעה, עם זאת שמו האמיתי הוא לולאה של קולה.

החומר איתו מיוצרת הידית הוא בדרך כלל סגסוגת ניקל-כרום (nichrome) או פלטינה. מגוון נוסף הקיים בשוק הם לולאות חיידקים חד פעמיות מפלסטיק.

מצד שני ישנם כמה סוגים של לולאות בקטריולוגיות, שכל אחת ממלאת תפקיד במסגרת המשימות שמבצע מיקרוביולוג. בחירת הידית תהיה תלויה במה שצריך לעשות.

לדוגמא, לביצוע סטריאטום על ידי דלדול על מנת לבודד מיקרואורגניזם משתמשים בלולאת הפלטינה שמסתיימת בטבעת סגורה, ללא קשר אם היא מכוילת או לא.

בעוד שאם מדובר בזריעה של דגימת שתן, שם חשוב לכמת CFUs, יש צורך להשתמש בלולאה המכוילת. באופן דומה, כדי לחסן בדיקות ביוכימיות, הדורשות להזרע באמצעות ניקוב, לולאת המחט חיונית. חשוב שהידית מטופלת על ידי אנשי צוות מיומנים.

מאפיינים

לולאות בקטריולוגיות מורכבות משני קצוות. קצה אחד תואם את הידית או הבסיס, ואילו השני הוא הידית עצמה.

ידית בסיס או ידית

הבסיס משמש לאחיזת הידית במהלך הטיפול. זה בדרך כלל מתכתי, אך יש לו מבודד חום המונע את צריבת המפעיל כאשר קצה הידית מעוקר על המצית. גודלו כ 20 ס"מ, אם כי הוא יכול להיות ארוך יותר. יש לו חוט להתאמת הידית.

ידית

זהו הסוף התפקודי, כלומר זהו החלק שבא במגע עם מיקרואורגניזמים ועם אמצעי התרבות. זה מורכב מחוט עדין המוחדר לבסיס.

הידית יכולה להיות עשויה מניכרום או פלטינה, וזו הסיבה שהיא נקראת לפעמים ידית פלטינה. אורכו כ -6.5 ס"מ ובאורך של כ- 0.20 מ"מ. הידית עם הידית יכולה להיות 26.5 ס"מ. המדידות עשויות להשתנות מיצרן ליצרן.

סוגים

ישנם מספר סוגים של לולאות בקטריולוגיות ולכל אחד מהם יש שימוש ספציפי. סוגי הידיות הם כדלקמן: ידית מעוגלת בצורת טבעת, ידית בצורת טבעת ללא כיול, ידית ישר או מחט, ידית מרווח, ידית בצורת "L" וידית חדה עם קצה חדה.

מצד שני, הידיות יכולות להיות קבועות או חד פעמיות. אלה לשימוש קבוע מעוקרים במצית, לשימוש חוזר ועמידים מאוד. בעוד חד פעמי הם סטריליים מהמפעל, הם משמשים רק פעם אחת ומושלכים.

יישומים

ידית טבעת, לא מכוילת

זוהי הידית המשמשת ביותר במעבדה למיקרוביולוגיה. הוא משמש לנטילת חיסון של השעיה מיקרוביאלית (מדיום נוזלי) או חלק של מושבה (מדיום מוצק), כדי להזרע במדיום תרבות אחר, מבחן ביוכימי או מדיום מועשר או סלקטיבי יותר, לפי העניין. זה שימושי גם להכנת מריחות מיקרוביאליות בשקופית.

בעזרת לולאה מסוג זה ניתן לפסים את החיסון הראשוני. הוא גם מתוכנן כך שהוא יחליק בצורה חלקה על האגר, מבלי לפגוע בו. כמובן, זה דורש צוות מיומן שיטפל בטכניקת הזריעה, יישום הכוח והתנועות הנכונים בכדי לבצע הפשטה טובה.

ניתן לבצע טכניקות זריעה שונות בעזרת ידית זו. דוגמה, אמצעי תקשורת מוצקים בכלי פטרי זורמים בדרך כלל מתשישות (ישנן כמה טכניקות, ראו סרטון 1).

טכניקה זו נועדה להשיג מושבות מבודדות על מנת ללמוד ולזהות אותן, במיוחד כאשר הדגימה היא פולימיקרוביאלית, כלומר התרבות אינה טהורה (היא מכילה יותר מסוג אחד של מיקרואורגניזם).

במקום זאת, הטבעות נטועים בזיגזג פשוט להשגת מסת חיידקים, ואינם נחוצים במקרה זה לבידוד מושבות.

לפעמים הם משמשים גם כדי לקחת דגימות מסוימות. לדוגמה, Rojas et al. השתמשו בלולאה הבקטריולוגית כדי לאסוף דגימות של רקמות נרתיקיות מגרדות מחולדות.

לולאה בקטריולוגית עם קצה הטבעת, לא מכוילת. מקור: Pixinio.com

ידית בצורת טבעת, מכוילת

ידית זו כפי ששמה מרמז מכוילת בכדי לקחת כמות מסוימת של השעיה מיקרוביאלית. משתמשים בו כאשר יש צורך בכך שהחיסון יעמוד בתקן המקובל באמנות.

לדוגמא, זה נפוץ מאוד לשתילת תרבויות שתן. במקרה זה, ניתן להשתמש בלולאה מכוילת של 0.01 מ"ל ו 0.001 מ"ל.

יש לציין כי בידיות מכוילות יש שולי שגיאה, המשתנים בהתאם לזווית איתה נלקחת הדגימה וגודל פיה של המכולה.

אם לולאה 0.001 מ"ל מוכנסת אנכית למיכל עם פה קטן (≤ 7 מ"מ), הכמות שנלקחה תהיה 50% פחות מהרצוי.

זה קורה מכיוון שככל שקוטר הפה של המכל קטן יותר, כך מתח המשטח גבוה יותר ולכן כוחות ההדבקה בין (זכוכית - נוזל) גדלים. זה גורם למטען הנוזלים שלוקח הידית להיות פחות.

ואילו אם הוא נלקח בזווית של 45 ° במיכל עם פה רחב (≥ 22 מ"מ), ניתן לאסוף 150% יותר מהכמות הנדרשת. במקרה זה, מתח השטח נמוך יותר וכוחות הלכידות של הזכוכית / הפלסטיק יורדים ואילו כוח הלכידות הנוזלי-נוזלי גדל.

בגלל האמור לעיל, לעיתים עדיפות שיטות אחרות לכימות יחידות המייצרות מושבה לתרבויות שתן.

ידית ישר או מחט

זה נקרא גם ידית חוט. הוא משמש לחיסון בדיקות ביוכימיות מסוימות, במיוחד אלה הדורשות לזרוע באמצעות טכניקת הניקוב. דוגמה, מדיה חצי מוצקה המוכנים בצורה של בלוק, כגון: SIM, MIO ו- O / F בינוני.

בנוסף, במקרה של MIO ו- SIM המעריכים תנועתיות, חיוני כי הניקוב יבוצע באמצעות לולאת מחט, שכן הפרשנות של תנועתיות חיובית מתרחשת כאשר החיידקים צומחים לכיוון צידי החיסון הראשוני.

מבחן המחוסן בלולאת לולאה יכול לזייף תוצאות (חיוביות שגויות). מסיבה זו בסוג זריעה זה יש להקפיד שהנקב ייחודי, וכאשר הוא מוסר הוא יוצא לאותו כיוון אליו נכנס.

מבחן נוסף שצריך לזרוע מחט למרות שהוא מוכן בצורת טריז הוא הקליגר. בבדיקה זו לא מומלץ לחמצן לחדור עמוק לתוך האגר, שכן דרוש אמצעי גרוע בחמצן בכדי להתרחש תגובות כימיות מסוימות. ידית זו משמשת גם לנגיעה במושבה ספציפית לצורך תת-תרבות.

מרחיב ידית

מרבית המיקרואורגניזמים מעניקים מושבות רכות וקלות להשפכה. עם זאת, ישנם כמה סוכנים חיידקים שהמושבות שלהם קשים ויבשים, למשל mycobacteria בכלל וחלק מהפטריות. במקרים אלה כדאי להשתמש בידית המרית.

ידית בצורת "L"

השימוש השכיח ביותר בו הוא פעמון תרבויות פטרייתיות, ובעיקר תבניות.

ידית קצה חדה

זה שימושי לנטילת מושבות קטנות מאוד שנמצאות בתרבויות פולימיקרוביאליות, על מנת להיות מסוגלים לתרב אותן.

טכניקות זריעה

סרטון 1

עיקור ידית הפלטינה

יש לעקר את הידית לפני ואחרי השימוש. כדי לעקר את הלולאה הבקטריולוגית במצת, המשך כדלקמן: יש למקם את הידית בחלקו העליון של הלהבה, לאמץ תנוחה אנכית ככל האפשר, באופן שעיקור מהקצה כלפי מעלה.

כאשר הנימה העדינה הופכת לאדום בהיר, ניתן לומר שהיא סטרילית. כדי להשתמש בו הוא מקורר והדגימה שנבחרה נלקחת. (ראו סרטון 2).

עיקור הלולאה הבקטריולוגית

סרטון 2

הפניות

"לולאה בקטריולוגית" ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 23 יולי 2019, 13:31 UTC. 18 אוגוסט 2019, 22:45. ויקיפדיה.
Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. ידיות מתכת מכוילות למיקרוביולוגים: אלטרנטיבה לייצור לאומי. סוס בוא. מיקרוביול. 2010; 30 (1): 37-42. ניתן להשיג ב: ve.scielo.org
פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. עריכה Panamericana SA ארגנטינה.
Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. מהדורה חמישית עריכה Panamericana SA ארגנטינה.
Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, et al. קביעת ההשפעה המשכך כאבים של תמצית הקסאן מפרחי Eupatorium arsenei במודל כאב חריף אצל חולדות. מקס. מַדָע. חווה חקלאית. 2015; 46 (1): 64-69. ניתן להשיג ב: scielo.org

לולאה בקטריולוגית: מאפיינים, סוגים, שימושים - ביולוגיה - 2025