אגר XLD: רציונל, הכנה ושימושים - ביולוגיה - 2025

אגר XLD או Xylose ליזין desoxycholate אגר בינוני הוא סלקטיבית ותרבות מוצקה הפרש לבידוד תרמי של enteropathogens. טיילור עיצב את הנוסחה של אגר XL (Xylose, Lysine) על מנת לשפר את הבידוד של סוג השיגלה.

הוא ציין כי מין זה נעצר ברוב המדיה המיועדת לבידוד enteropathogens. בהמשך, נוספו נתרן deoxycholate, נתרן thiosulfate ו- ammonium ferrat כדי להגדיל את סלקטיביותו. נוסחה זו הוכחה כמועילה הן לבידודן של שיגלה והן סלמונלה.

הבדלים במושבות שיגלה, סלמונלה וקוליפורמים על אגר XLD. A. Shigella sp, B. Salmonella sp, C. Coliforms. מקורות: א. מאת: CDC / אמנדה מור, מ.ת. טוד פרקר, דוקטורט; אודרה מארש, באדיבות: ספריית התמונות לבריאות הציבור ב. Https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/Salmonella_species_growing_on_XLD_agar_-_Showing_H2S_production_-_Detail.jpg C. מאת: CDC / Dr. חקלאי ג'יי ג'יי, באדיבות: ספריית תמונות לבריאות הציבור

אגר XLD מורכב מתמצית שמרים, נתרן deoxycholate, קסילוז, ליזין, לקטוז, סוכרוז, נתרן תיוסולפט, אמוניום פריום, נתרן כלורי, פנול אדום ואגר. אגר XLD וצמד אגר של SS משמשים ברוב המעבדות לחיידקים לבדיקת דגימות צואת של שיגלה וסלמונלה.

מעבדות אחרות מעדיפות את השילוב של CHROMagar סלמונלה ואגר XLD, בין אפשרויות זמינות אחרות. ניתן להכין את הצמדים הללו במנות פטרי כפולות. בצד אחד הם מניחים אגר XLD ובצד הנגדי המדיום שנבחר.

בָּסִיס

-כוח תזונתי

לאגר XLD יש תמצית שמרים המשמשת כמקור חומרים מזינים למיקרואורגניזמים הצומחים על אגר זה. בנוסף, נוכחותם של פחמימות (קסילוזה, סוכרוז ולקטוז) מספקת אנרגיה לחיידקים שיכולים להתסיס אותם.

סלקטיביות של המדיום

כחומר מעכב, הוא מציג נתרן deoxycholate; זה מונע גידול של חיידקים גראם חיוביים, מה שמעניק למדיום אופי סלקטיבי.

-כוח דיפרנציאלי

מושבות שיגלה טיפוסיות

כאמור, אגר XLD מכיל קסילוזה; פחמימה זו מותססת על ידי כל החיידקים הגדלים במדיום זה למעט סוג השיגלה.

זהו אחד המאפיינים המעניקים לו את אופיו ההבדל, מכיוון שמושבות השיגלה נבדלות משאר על ידי פיתוח מושבות אדומות, בעוד שאר החיידקים מייצרים מושבות צהובות.

מושבות טיפוסיות של סלמונלה

הסוג סלמונלה מתסס גם את קסילוזה, בהתחלה מייצר מושבות צהובות. עם זאת, לאחר דלדול הפחמימות קסילוז, הוא תוקף ליזין עבור האנזים ליזין דקרבוקסילאז שלו. הדקרבוקסילציה של ליזין מייצרת אלקליות שהופכות את צבע המושבה ואת המדיום שמסביב לאדום המקורי.

התנהגות זו מתבצעת רק על ידי סלמונלה, מכיוון שהקוליפורמים המגבילים את ליסין דקארבוקסילטיים אינם יכולים ליצור בסיס בינוני. הסיבה לכך היא שקוליפורמים תוססים גם את הלקטוז והסוכרוז שנמצאים; לפיכך, ייצור החומצות הוא גבוה מאוד ומשאיר את המושבה הצהובה בחיידקים אלה.

יש לציין כי סוג הסלמונלה אינו תוסס סוכרוז או לקטוז.

הפקת H

אגר XLD מאפשר גם גילוי של זני סלמונלה המייצרים H ₂ S; לשם כך הוא מסתמך על מקור הגופרית המיוצגת על ידי נתרן תיוסולפט ומפתח תגובה, שהוא אמוניום ציטראט.

האחרון מגיב עם H ₂ S (גז חסר צבע) ויוצר משקע שחור שחור בלתי מסיס של ברזל סולפט. במובן זה המאפיינים של מושבות הסלמונלה יהיו אדומים עם מרכז שחור.

יש לציין כי לצורך התגובה להיווצרות H ₂ S יש צורך ב- pH בסיסי. לכן Enterobacteriaceae אחרים היוצרים H ₂ S אינם יכולים או עושים זאת בצורה גרועה בסביבה זו, מכיוון שהחומציות הגבוהה המיוצרת על ידי תסיסת הפחמימות הקיימות מעכבת או מעכבת את התגובה.

-סודיום כלוריד, אגר ופנול אדום

לבסוף, נתרן כלורי שומר על איזון אוסמוטי; אגר הוא חומר הממצק ואדמת פנול מזהה שינויי pH, והופכת את צבע המושבות והמדיום.

הכנה

שוקלים 55 גרם של מדיום XLD מיובש וממיסים בו ליטר מים. מחממים ומערבבים את התערובת עד שהיא מגיעה לנקודת הרתיחה. אל תחמם יתר על המידה, שכן החום פוגע במדיום ויוצר משקעים המשנים את המורפולוגיה של מושבות טיפוסיות.

אסור לחסום את המדיום הזה באופן אוטומטי. בעת ההמסה יש להעביר אותה לאמבטיית מים ב 50 מעלות צלזיוס. בעת הקירור יש להגיש אותו ישירות על כלים פטרי סטריליים. ניתן לשפוך אותם לצלחות בודדות או לצלחות כפולות. הם נותרים להתמצקות ומאוחסנים במקרר עד לשימוש.

טמפרטורה לפני השימוש. מכיוון שמדובר במדיום לא סטרילי, מומלץ להכינו בסמוך למועד השימוש.

ה- pH הסופי של המדיום צריך להיות 7.4 ± 0.2. צבע המדיום המוכן הוא אדום-כתום, שקוף, ללא משקעים.

אם יש לך אגר בסיס Xylose Lysine (XL), אתה יכול להוסיף נתרן deoxycholate, נתרן thiosulfate ו ammonium citrat ברזל. בדרך זו מתקבלת נוסחת אגר XLD.

יישומים

אגר XLD משמש להחלמת אנטרופתוגנים, בעיקר של הסוג שיגללה ושנית של הסוג סלמונלה. זה שימושי להערכת דגימות צואה, מים ומזון.

סוגי דגימות

צוֹאָה

ניתן לזרוע דגימות צואה ישירות על אגר XLD, מה שהופך חלוקה טובה של החומר לקבלת מושבות מבודדות.

כדי לשפר את ההתאוששות של סלמונלה, ניתן לפשט אגר XLD מתקשורת העשרת סלמונלה.

מזון

במקרה של אוכל, ניתן להשתמש במזילי העשרה לסלמונלה ושיגלה. עבור סלמונלה אתה יכול להשתמש במרק ציסטין סלניט, מרק tetrathionate ירוק בהיר, בין היתר.

במקרה של שיגלה, ניתן להעשיר אותו במרק שיגלה עם 0.5 מיקרוגרם / מ"ל ​​של נובוביוזין, דגירה בחום של 42 מעלות צלזיוס למשך 16-20 שעות.

מים

בניתוח מים מומלצים בין היתר טכניקת סינון הממברנה והשימוש באגר XLD.

תנאי שתילה וזיהוי

המדיום הזרע מודגר בצורה אירובית ב 35 מעלות צלזיוס למשך 24 עד 48 שעות.

מושבות המושבות האופייניות לכל סוג, על המושבות החשודות לעבור בדיקות ביוכימיות לצורך זיהוין.

QA

כדי להעריך את בקרת האיכות של המדיום, ניתן להשתמש בזני החיידקים הבאים: סלמונלה טיפימוריום ATCC 14028, סלמונלה enteritidis ATCC 13076, סלמונלה אבוני DSM 4224, Shigella flexneri ATCC 12022, Shigella sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, ProteC mir7130 , Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.

הסוג סלמונלה מאופיין בהצגת מושבות אדומות עם מרכז שחור או מושבות שחורות לחלוטין על מדיום זה. ואילו בסוג השיגלה המושבות צריכות להיות אדומות, כלומר צבע המדיום.

במקרה של Escherichia coli, זה צפוי להיות מעוכב לחלוטין או חלקי; אם היא גדלה המושבות צהובות. לגבי Proteus mirabilis, צפויה צמיחה לקויה עם מושבות ורודות עם או בלי מרכז שחור. בסופו של דבר מין Klebsiella יגדל כמושבות צהובות.

מחשבות אחרונות

אגר XLD נמצא בשימוש נרחב במעבדות בקטריולוגיה כיעילותו הגבוהה להחלמת שיגלה ויש לו גם התאוששות טובה של הסוג סלמונלה.

Rall et al. (2005) בעבודתם שכותרתה "הערכה של שלוש מרקי העשרה וחמישה מדיות מוצקות לגילוי סלמונלה בעופות" הדגימו כי מבין 3 המדיות הקלאסיות שנבדקו (אגר ירוק בהיר, אגר SS ואגר XLD) , אגר XLD היה עם שיעור ההתאוששות הטוב ביותר.

אחוזי ההתאוששות היו כדלקמן: 13.8% עבור אגר ירוק בהיר, 27.6% עבור SS ו- 34.5% עבור XLD. אגר רמבך עם התאוששות של 48% ו- ​​CHROMagar עם 79.3% הושגה רק באמצעות אמצעי תקשורת כרומוגניים.

הפניות

1. מחלות הנישאות במזון. שיגלוזיס. ניתן להשיג ב: anmat.gov.ar
2. "אגר XLD." ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 9 פברואר 2019, 11:46 UTC. 10 אפריל 2019, 19:25 wikipedia.org
3. מעבדות BBL. CHROMagar Salmonella / BD XLD Agar (דו משמעתי). 2013 זמין ב: bd.com
4. מעבדה ניוגן. אגר XLD. ניתן להשיג ב: foodsafety.neogen
5. מעבדת פרנסיסקו סוריה מלגיזו. XLD אגר. ניתן להשיג בכתובת: http://f-soria.es/Inform
6. Rall L, Rall R, Aragon C, Silva M. הערכת שלוש מרקי העשרה וחמישה אמצעי ציפוי לגילוי סלמונלה בעופות. בראז. ג'יי מיקרוביול. 2005; 36 (2): 147-150. ניתן להשיג ב: scielo.br
7. פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. עריכה Panamericana SA ארגנטינה.