אגר פוגל-ג'ונסון: רציונל, הכנה ושימושים - ביולוגיה - 2025

אגרתי פוגל-ג'ונסון היא תרבות סלקטיבי הפרש הבינוניים מוצקה, פותח במיוחד עבור הבידוד של aureus Staphylococcus. המדיום הזה נוצר על ידי ווגל וג'ונסון בשנת 1960 משינוי אגר גליצין אסלורי שנוסח בשנת 1955 על ידי זבוביץ ', אוונס וניבן.

השינוי כלל העלאת ריכוז המניטול שנמצא במדיום ושילובו של אינדיקטור pH. הנוסחה הנוכחית מורכבת מ טריפטין, תמצית שמרים, מניטול, דיפוטסיום פוספט, ליתיום כלוריד, גליצין, אדום פנול, אגר, תמיסת אשלגן 1% אשלגן ומים.

מקור: Pixinio.com/Laboratorio de la Clínica ProcreaTec. פליקר.

יש לציין כי ישנן אמצעי תקשורת אחרים שכמו אגר פוגל-ג'ונסון הם סלקטיביים לבידודו של ש.אוראוס, כמו אגר מניטול מלוח ואגר בייר פארקר. במובן זה ניתן לומר כי היסוד של אגר פוגל-ג'ונסון הוא תערובת בין אגר מניטול מלוח לאגר Baird Parker.

בראשון נבדלות מושבות S. aureus על ידי תסיסה של המניטול והפיכת מחוון ה- pH לצהוב. לעומת זאת, בשני, S. aureus מאופיינת בהפחתת הטלוריט לטלוריום ויצירת מושבות אפורות לשחורות. שתי המאפיינים נצפים באגר פוגל-ג'ונסון.

מדיום זה, כמו מקביליו, שימושי לגילוי Staphylococcus aureus בדגימות מזון, בקרה סניטרית של מוצרים תעשייתיים ובדגימות קליניות.

בָּסִיס

אספקת תזונה

מדיום פוגל-ג'ונסון מכיל תמצית טריפטין ושמרים; שני החומרים מספקים חומצות אמינו ארוכות שרשרת המשמשות כמקור לפחמן וחנקן הנחוצים לגידול חיידקים. חיידקים המסוגלים לגדול במדיום זה ייקחו את החומרים המזינים מחומרים אלה.

כוח סלקטיבי

אגר פוגל-ג'ונסון מסוגל לעכב את צמיחתם של חיידקים גראם שליליים ואפילו כמה חיידקים גראם-חיוביים, ומעדיף התפתחות של סטפילוקוקים חיוביים לקרישה. החומרים המעכבים הם אשלגן טלוריט, ליתיום כלוריד וגליצין.

כוח דיפרנציאלי

החומרים היוצרים מדיום דיפרנציאלי זה הם מניטול ואשלגן טלוריט. המניטול הוא פחמימה, וכאשר הוא מיוצר חומצות תוססות הגורמות למדיום להפוך לאדום לצהוב, וזה קורה בזכות נוכחותו של אינדיקטור ה- pH של הפנול האדום.

ואילו הטסטור חסר הצבע כשהוא מופחת לטלור מתכתי חופשי, מקבל צבע אפור כהה לשחור.

Staphylococcus aureus תסס מניניטול ומפחית טלוריט לטלוריום. מסיבה זו, המושבות האופייניות של S. aureus במדיום זה הן אפורות או שחורות מוקפות במדיום צהוב.

חיידקים הצומחים במדיום זה ואינם מקטינים טניטור או מתסיסים את המניטול, יווצרו מושבות שקופות מוקפות במדיום בצבע אדום, עזים עוד יותר מהצבע המקורי, עקב התייבשות המדיום על ידי שימוש בפפונים.

מצד שני, חיידקים שמפחיתים טורטור אך לא מתסיסים את המניטול יגדלו כמושבות אפורות או שחורות מוקפות במדיום אדום עמוק.

אם המדיום היה מוכן ללא תוספת של אשלגן טלוריט, מושבות S. aureus היו מתפתחות כמושבות צהובות, מוקפות במדיום צהוב, כמו באגר מניטול מלוח.

איזון אוסמוטי וחומר מיצוק

הדיפוטסיום פוספט שומר על האיזון האוסמוטי של המדיום ומתאים את ה- pH לניטרליות 7.2. ואילו האגר מעניק את העקביות המוצקה למדיום התרבות.

הכנה

תמיסת אשלגן אשלגן 1% w / v

תמיסה זו אינה כלולה במדיום המיובש, מכיוון שלא ניתן לעקר אותה בחיטוי. מסיבה זו הוא מוכן בנפרד ומתווסף למדיום המעוקר שכבר.

חלק מהבתים המסחריים מוכרים את הפתרון המוכן לשימוש 1% אשלגן אשלגן. אם אתה רוצה להתכונן במעבדה, המשך כדלקמן:

שקלו 1.0 גרם של אשלגן טלוריט ומדדו 100 מ"ל מים מזוקקים. ממיסים את אשלגן הטלוריט בחלק של מים ומשלימים את כמות המים עד שמגיעים ל 100 מ"ל. עקר את הפתרון בשיטת סינון.

Vogel-Johnson Agar Base Medium

שקלו 60 גר 'מהמדיום המיובש, והמיסו בליטר מים מזוקקים. התערובת מחוממת לרתיחה כדי לסייע לפירוק מוחלט. בתהליך הפירוק מערבבים את המדיום לעתים קרובות.

יש לעקר במערכת החיטוי בלחץ של 15 פאונד ו -121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות. מוציאים מהחיטוי והניחו לו לנוח עד שהמדיום יגיע לטמפרטורה של 45-50 מעלות צלזיוס. הוסף 20 מ"ל מתמיסה אשלגן אשלגן 1% שהוכנה בעבר.

מערבבים ושופכים לכלי פטרי סטריליים. אפשר להתמצק ולהזמין הפוך על מחזיקי הצלחות לאחסן אחר כך במקרר עד לשימוש.

ה- pH הסופי של המדיום המוכן צריך להיות 7.2 ± 0.2.

לפני זריעת מדגם, המתן שהצלחת תגיע לטמפרטורת החדר.

צבע המדיום המוכן אדום.

להשתמש

למרות שניתן להשתמש בו לבידוד S. aureus בכל סוג של דגימות, הוא משמש בעיקר לניתוח מיקרוביולוגי של מוצרים פרמצבטיים, קוסמטיקה ומזון.

מומלץ כי החיסון יהיה צפוף. הזריעה יכולה להיעשות על ידי ניקוד בעזרת ידית פלטינה או על ידי משטח בעזרת מרית דריגלסקי.

צלחות מודגרות בטמפרטורה של 35-37 מעלות צלזיוס למשך 24 עד 48 שעות אירוביוזיס.

QA

ניתן להשתמש בזני הבקרה הבאים לביצוע בקרת איכות במדיום פוגל-ג'ונסון:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 או Proteus mirabilis ATCC 43071.

התוצאה הצפויה היא כדלקמן: עבור S. aureus זנים הצמיחה משביעת רצון עם מושבות שחורות מוקפות במדיום צהוב. עבור S. epidermidis צמיחה קבועה עם מושבות שקופות או שחורות מוקפות במדיום אדום.

כמו כן, צפויה עיכוב מוחלט ל- E. coli ועיכוב חלקי או מוחלט של Proteus mirabilis; אם הוא יגדל הוא יעשה זאת במשורה והמושבות יהיו שחורות מוקפות בצבע אדום.

הפניות

1. מעבדות BD. VJ (פוגל וג'ונסון אגר). 2006. זמין ב: bd.com
2. מעבדות בריטניה. פוגל - ג'ונסון אגר. 2015. ניתן להשיג ב: britanialab.com
3. מעבדות בריטניה. טלוריט אשלגן. 2015. זמין ב: britania.com
4. מעבדת הימדיה. פוגל- ג'ונסון אגר בינוני. 2018. זמין ב: himedialabs.com/TD/MU023.pdf
5. פוגל- בסיס ג'ונסון אגר. מדריך מיקרוביולוגיה של Merck. מהדורה 12, עמ '502-503. ניתן להשיג באתר: משתמשים / צוות / הורדות
6. תורמים לוויקיפדיה, "אגאר פוגל ג'ונסון", ויקיפדיה ללא אנציקלופדיה, זמין בכתובת: wikipedia.org.
7. קנזין סטנדרטית בוונצואלה 1292-89. (1989). אוכלים. בידוד וספירה של Staphylococcus aureus. ניתן להשיג ב: sencamer.gob.ve