אגר תאיר מרטין: בסיס, הכנה ושימושים - ביולוגיה - 2025

אגר תאייר מרטין הוא מדיום סלקטיבית מזין מוצק מאוד לבידוד של meningitidis Neisseria ו Neisseria gonorrhoeae; שניהם ידועים כ- Neisserias פתוגניים או חשובים קלינית.

אחד המאפיינים המיוחדים החשובים ביותר של תאייר מרטין אגר הוא התכולה הגבוהה שלו בתוספי תזונה. מאפיין זה חיוני, מכיוון ש Neisserias הם מיקרואורגניזמים תובעניים מאוד מבחינה תזונתית ולכן אינם צומחים בתקשורת נפוצה.

תאייר מרטין / אגר תאייר מרטין המדיום העסקי. תמונת המקור 1: צולמה על ידי המחבר MSc. Marielsa Gil, תמונה 2. Pixinio.com bacteriacolonized, שונה, תאיר, מרטין, אגר.

מצד שני, מכיוון שמיקרואורגניזמים אלה בדרך כלל נמצאים באזורים לא סטריליים, תוספת מעכבים הכרחית בכדי למנוע את צמיחת הפלורה המלווה, מבלי להשפיע על התפתחות הסוג Neisseria.

אגר זה מורכב מאגר בסיס GC, המוגלובין, תוספי תזונה נוספים ומכלול חומרים מעכבים (אנטיביוטיקה ונוגדי פטריות). בתי המסחר מוכרים כל אחד מהתוספים בנפרד.

המדגם שייזרע במדיום זה יהיה תלוי במיקרואורגניזם אותו מבקשים. עבור Neisseria gonorrhoeae הדגימות האידיאליות הן הפרשות וגינליות ושופכה. בעוד שעבור Neisseria meningitidis הדגימות המשומשות ביותר הן CSF, exudates של הלוע ו nasopharyngeal.

בָּסִיס

Neisserias הם מיקרואורגניזמים המסווגים כמעצבנים ולכן הבידוד שלהם קשה. לפיכך, תאייר מרטין הוא מדיום מורכב וכל אחד ממרכיביו ממלא תפקיד שמוסבר להלן:

אגר בסיס GC

אגר GC מכיל פפטון פרוטאוז, קורנפלור, נתרן כלורי, דיפוטסיום פוספט, מונופוטסיום פוספט ואגר אגר. מרכיביו מספקים את החומרים התזונתיים הבסיסיים להתפתחות מיקרוביאלית, מנטרלים חומצות שומן רעילות, מסייעים בשמירה על האיזון האוסמוטי, הגדרת ה- pH ומספקים עקביות יציבה למדיום.

הֵמוֹגלוֹבִּין

המוגלובין מספק גורמים V ו- X (ניקוטינאמיד אדנין דינוקלוטייד NAD והמין בהתאמה). מסיבה זו, גם המין המפילוס גדל במדיום זה. ניתן להשיג את המוגלובין באופן מסחרי בצורה מיובשת, או להוסיף דם שור בקר טרי טריפיברטיבי למדיום.

תוספת העשרה

מצד שני, יש להוסיף תוסף העשרה למדיום תייר-מרטין, מכיוון שהחומרים המזינים הכלולים באגר הבסיס אינם מספיקים לדרישות הסוג Neisseria.

תוסף ההעשרה הנפוץ ביותר נקרא isovitalex. הוא מכיל גלוטמין, אדנין, NAD, קוקארבוקסילאז, גואנין, פרי ניטרט, חומצה אמינית בנזואית, ויטמין B12, תיאמין וגלוקוזה. כל התרכובות הללו נחוצות להתפתחות תקינה של ניאריותias פתוגניות.

מעכבים

מכיוון שמדובר במדיום מזין ביותר, יש להשתמש במעכבים המונעים את צמיחתם של מיקרואורגניזמים מהפלורה הרגילה של האזור ובכך מעדיפים את הבידוד של סוג Neeria.

קומפלקס המעכב מורכב מוונקומיצין, קוליסטין וניסטטין. Vancouveromycin מעכב את צמיחתם של חיידקים Gram חיוביים, colistin מונע את צמיחתם של חיידקים Gram שליליים כמו Pseudomonas וכמה Neisserias saprophytic, ו ניסטטין פועל על שמרים כמו קנדידה אלביקנס.

עם זאת, תאייר מרטין אגר שונו מאוחר יותר; השינויים כללו תוספת של טרימתופרים, עלייה בכמות האגר ותוספת גלוקוז נוסף. שינויים אלה שיפרו משמעותית את ההתאוששות של מינים Neisseria gonorrhoeae.

יש לציין כי trimethoprim מעכב את צמיחתו של הסוג Proteus ואת היווצרותו הנחשכת כתוצאה מכך. במובן זה, האנטיביוטיקה היא זו המספקת את האופי הסלקטיבי למדיום תייר מרטין.

הכנה

אגר מקורי של תאייר מרטין

אגר GC

שוקלים 8.2 גרם של מדיום GC מיובש ומשלים אותו ב 100 מ"ל. מערבבים ומרתיחים דקה תוך ערבוב תכוף להתמוסס לחלוטין. עקר את התערובת בחיטוי בחום של 121 מעלות למשך 15 דקות.

- המוגלובין של 2%

השעית 2 גרם של המוגלובין מיובש ב 2 או 3 מ"ל מים מזוקקים חמים עד שנוצרת תערובת אחידה. הוסף מעט יותר מעט מים כדי להשלים נפח של 100 מ"ל. ההשעיה חייבת להיות הומוגנית לפני עיקור.

מעקרים בחיטוי למשך 15 דקות.

תוסף העשרה

החזר את הבקבוקון המסחרי עם הדילול המסופק על ידי אותה חברה מסחרית. מערבבים היטב. כמות הדילול לשימוש תוגדר בהוראות הערכה.

תוסף עיכוב VCN (וונקומיצין, קוליסטין, ניסטטין)

החזר את הבקבוקון מחדש עם הדילול המסופק על ידי החברה המסחרית. מערבבים היטב. כמות הדילול לשימוש תוגדר בהוראות הערכה.

-מוּכָן

עבור כל 100 מ"ל של אגר GC המשך כדלקמן:

כאשר אגר ה- GC עוזב את החיטוי, אפשר לו להתקרר לטמפרטורה של כ- 50 מעלות צלזיוס ולהוסיף 2 מ"ל מתמיסת ההמוגלובין המוכנה, 2 מ"ל מתוסף ההעשרה (איזוביטלקס או בריטלקס), ו -2 מ"ל מתוסף ההעכבה. מערבבים ומגישים בכלי פטרי סטריליים.

לאפשר להתמצק ולאחסן במקרר עד לשימוש.

צבע המדיום המוכן הוא אדום דובדבן. ה- pH הסופי של המדיום הוא 7.2 ± 0.2

אגר תאייר שונה

שוקלים 8.2 גרם של מדיום GC מיובש ומשלים אותו ב 100 מ"ל. הוסף 1 גרם אגר-אגר והוסיף 0.3 גרם גלוקוז. מערבבים ומרתיחים דקה תוך ערבוב תכוף להתמוסס לחלוטין. עקר את התערובת בחיטוי בחום של 121 מעלות למשך 15 דקות.

הכן את המוגלובין ותוסף העשרה כמתואר לעיל.

תוסף הדיכוי המשמש הוא VCNT (וונקומיצין, קוליסטין, ניסטטין, טרימתופרים).

-מוּכָן

המשך כמתואר עבור אגר התייר מרטין המקורי.

להשתמש

יש לאפשר לתאייר מרטין אגר לחמם לפני שדגימה מפוספסת. דגימות נפוצות הן ספוגיות בלוע, ספוגיות באף, פריקה מהנרתיק, השופכה ו / או פי הטבעת ו- CSF.

השתמשו במדגמים טריים והכינו חיסונים חזקים על האגר. הדגימות נזרעות ישירות על ידי פריקה מחומר ואז מתישים על פני השטח.

הצלחות מודגרות בטמפרטורה של 35-37 מעלות צלזיוס למשך 24 עד 48 שעות בצנצנת מיקרואירופילית (5% CO ₂ ). בתום זמן הדגירה נבדקות הלוחות במושבות קטנות, אפורות ולעיתים במראה מוטי.

בצעו בדיקות גראם וביוכימיה מאושרות על מושבות חשודות.

QA

ניתן להשתמש בזני החיידקים הבאים לבקרת איכות של תייר מרטין אגר.

Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 ו- Neisseria meningitidis ATCC 13090; התפתחות משביעת רצון צפויה בשני הזנים.

כמו כן יש לכלול את הזנים הבאים: Staphylococcus epidermidis ATCC 14990, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 43071 ו- Candida albicans ATCC 10231. בכולם צפויה עכבה מוחלטת או חלקית במדיום זה.

מגבלות

עלינו לזכור כי חיידקים עמידים למעכבים המשמשים יכולים לגדול במדיום.

ישנם זנים של Neisseria gonorrhoeae שיכולים להיות רגישים לריכוז הוונקומיצין המשמש. מסיבה זו, מומלץ להשתמש באגר שוקולד בתוספת איזוביטלקס, אך ללא מעכבים.

-יש זנים של שמרים עמידים לניסטטין שיכולים לצמוח במדיום זה ולהפריע לבידודם של נייסריאס פתוגניים, במיוחד גונוקוקים.

הפניות

1. מעבדות אבחון וולטק. תאיר-מרטין אגר. 2016. ניתן להשיג ב: com
2. מעבדות בריטניה. תאייר מרטין בינוני שונה. 2010. ניתן להשיג ב: britanialab.com
3. תורמים בוויקיפדיה. אגר תאיר-מרטין. ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 26 באוקטובר 2017, 16:33 UTC. ניתן להשיג ב: wikipedia.org 4. ניגש ל- 28 בפברואר 2019.
4. מעבדות בריטניה. אגר GC. 2010. ניתן להשיג ב: britanialab.com.
5. מעבדות BBL ™ העשרה בינונית למיקרואורגניזמים מהירים. 1999. זמין ב: bd.com
6. פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. עריכה Panamericana SA ארגנטינה.