אגר סויה של טריפטיקזין: רציונל, הכנה ושימושים - ביולוגיה - 2025

הסויה אגרו tryptone או Trypticase הסויה אגר היא מדיום תרבות מוצק, ואת לא סלקטיבי תזונתי. היא מיועדת על ידי האותיות TSA עבור ראשי תיבות שלה באנגלית Trypticase Soy Agar. הוא מורכב מטריפטין, פפטה סויה, נתרן כלורי ואגר אגר.

בשל עוצמת התזונה הגבוהה שלו, הוא אידיאלי לגידול של מיקרואורגניזמים תובעניים ובלתי דורשים. בינוני ללא תוספות נוספות אינו מומלץ לתרבויות ראשוניות, אך הוא שימושי מאוד לתת-תרבות זנים טהורים ולשמירתם בר קיימא, בין שימושים אחרים.

טריזי אגר סויה של טריפטיקזין בצינורות עם כובעי בקליט. מקור: תצלום שצולם על ידי הסופר MSc. מריאלסה גיל.

כמו כן, אגר זה משמש בסיס להכנת חומרים מועשרים כגון אגר דם, במיוחד כאשר הוא נדרש להקפיד על דפוסי המוליזה ולהרכיב את המיסות של אופטוקווין ובציטראצין, הנדרשים באבחון Streptococcus pneumoniae ו- Streptococcus pyogenes בהתאמה.

לעומת זאת, בשילוב עם אנטיביוטיקה, זה שימושי לבידוד מיקרואורגניזמים אנאירוביים פרולטקטיבים וחשובים קלינית מדגימות עם פלורה מעורבת.

לבסוף, הרכב אגר הסויה של טריפטיקזין וביצועיו עונים על הדרישות שקבעו הפרמקופואיות השונות (אירופאיות, יפניות וצפון אמריקה).

בָּסִיס

לצורך התפתחות תקינה של חיידקים, נוכחות אספקת אנרגיה הכרחית, כמו חומצות אמינו, ויטמינים, בסיסים פוריים ופירימידיים.

במובן זה, טריפטיין ופפון סויה מספקים חומרים מזינים אלה למיקרואורגניזמים, ובכך מאפשרים את התפתחותם המלאה. עם זאת, עבור חיידקים קשוחים יש צורך להוסיף את האגר הזה בדם מפושט או בדם מחומם כדי להגביר את העשרתו.

מצד שני, אם מתווספים אנטיביוטיקה למדיום זה הופך למדיום סלקטיבי. ניתן להוסיף תמצית שמרים של 0.6% כדי להעדיף את הבידוד של מינים מהסוג ליסטריה, בעוד שתוספת של ציסטין טלוריט ודם כבש היא אידיאלית עבור Corynebacterium diphteriae.

לבסוף, הנתרן כלוריד מספק את האיזון האוסמוטי למדיום והאגר מספק את העקביות המוצקה.

הכנה

צלחות סויה אגר של טריפטיקזין

להכנת אגר סויה של טריפטיקזין, יש לשקול 40 גרם של המדיום המסחרי המיובש בקנה מידה דיגיטלי. הוא מומס בליטר אחד של מים מזוקקים הכלולים בבקבוק.

התערובת נותנת לנוח למשך 5 דקות ואז היא נלקחת למקור חום כדי לעזור להמיס את המדיום. יש לערבב אותו לעיתים קרובות ולהרתיח במשך 1-2 דקות. לאחר מכן, המדיסטר מעוקר במערכת החיטוי בטמפרטורה של 121 מעלות למשך 15 דקות.

אפשר להתקרר ל 50 מעלות צלזיוס ומחלק לכלי פטרי סטריליים. אפשר להתמצק, להפוך, להזמין בפלאקרוס ולאחסן במקרר.

ה- pH הסופי של המדיום צריך להיות 7.3 ± 0.2.

יש לציין כי צבעו של מדיום התרבות המיובש הוא בז 'בהיר ויש לאחסן בין 10 עד 35 מעלות צלזיוס, במקום יבש.

האגר המוכן מצידו בצבע ענבר בהיר. יש לאחסן צלחות מוכנות במקרר (2-8 מעלות צלזיוס) עד לשימוש.

על הצלחות להגיע לטמפרטורת החדר לפני השימוש.

צלחות אגר סויה של טריפטיקזין בתוספת דם

אגר הדם מוכן על ידי הוספת 5% דם מפיברבר בזמן קירור אגר הסויה הטריפטיקזין ל- 50 מעלות צלזיוס. התערובת הומוגנית על ידי סיבוב בתנועות עדינות.

מגישים בכלי פטרי סטריליים. הצבע האמצעי צריך להיות אדום דובדבן.

צלחות אגר סויה של טריפטיקזין בתוספת דם מחומם

כדי להכין את אגר הדם מבוסס ה- TSA יש להמשיך באותו אופן כמו בהליכים שכבר תוארו, אך כשעוזבים את החיטוי, תנו לו לנוח עד לטמפרטורת המדיום כ 56-70 מעלות צלזיוס. באותו זמן הדם מניח ומערבב עד שהמדיום משחים.

מגישים בכלי פטרי סטריליים. צבע המדיום הוא חום שוקולד.

טריזי סטי אגר טריפדיקזין

הליך הכנת האגר זהה לזה שתואר עבור צלחות, עם ההבדל שבמקום להגיש את המדיום על צלחות פטרי, הוא מופץ בין 10 עד 12 מ"ל בצינורות עם מכסה בקליט לפני הסטריליזציה.

לאחר מכן, הצינורות מוחדרים אוטומטית בטמפרטורה של 121 מעלות למשך 15 דקות. כאשר הם עוזבים הם נוטים בעזרת תמיכה ומורשים להתמצק.

הטווחים המוכנים נזרעים על ידי שטח פנים ומשמשים לשמור על קיימא של מיקרואורגניזמים לא תובעניים למשך זמן מוגדר.

יישומים

Trypticasein Soy Agar משמש במקרים הבאים:

-בסיס להכנת אגר הדם הקלאסי שמשמש באופן שגרתי ברוב המעבדות.

הבידוד של חיידקים תובעניים.

- שמירה על דפוס המוליזה.

-ביצוע בדיקות אבחון.

-בבסיס להכנת אגר דם מיוחד לדיפרתיה Corynebacterium, עם ציסטין טלוריט ודם כבש.

-בבסיס להכנת אגר בדם כבש, בתוספת קנמיצין-וונקומיצין לגידול אנאירובים, במיוחד Bacteroides sp.

- לשמירה על זנים לא תובעניים (Bacterioteca).

- ספירה מיקרוביאלית אירובית במחקר על גבול החיידקים של מים, סביבה, אוכל ודוגמאות קוסמטיות.

זָרוּעַ

ניתן להזריק דגימות ישירות על פני השטח של טריפטיקזין סויה אגר בתוספת דם או תוספים אחרים. זה נזרע על ידי תשישות.

ואילו, בדרך כלל, צלחות אגר סויה של טריפטיקזין ללא תוספים משמשים בדרך כלל לתרבית זנים חיידקים (חיידקים או שמרים).

QA

בקרת סטריליות

כדי לבדוק את הסטריליות של אמצעי המדיה השונים שהוכנו עם אגר בסיס סויה טריפטיקזין, מומלץ להלן: מכל אצווה מוכנה יש לדגור על צלחות או צינורות שאינם מחוסנים 1 או 2 בחום של 37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות כדי להדגים את הסטריליות שלהם. בכל המקרים עליו להישאר ללא צמיחה.

אם נמצא זיהום, יש להשליך את כל האצווה.

בקרת צמיחה

ניתן להשתמש בזני החיידקים הבאים לחקר תקינותם של אגר סויה של טריפטיקזין: Escherichia coli ATCC 8739, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aerugiosa ATCC 9027 ו- Enterococcus faecalis ATCC 29212.

הזנים זרעים ומודגרים אירובית ב 37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות.

בכל המקרים הצמיחה חייבת להיות מספקת.

ניתן להשתמש גם בפטריות כמו קנדידה אלביקנס קומפלקס ATCC 10231 ואספרגילוס ניגר ATCC 16404. צמיחה טובה צפויה לשני הזנים.

בקרת צמיחה ודפוס המוליזה של אגר סויה של טריפטיקזין בתוספת דם

כדי לאמת את תפקודו התקין של אגר הדם המוכן עם בסיס זה, ניתן להשתמש בזנים הבאים: Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 ו- Streptococcus pneumoniae ATCC 49619.

הם זרעים ומודגרים ב 37 מעלות צלזיוס במיקרואירופיליות למשך 24 שעות.

בכל המקרים, הצמיחה צריכה להיות משביעת רצון, כאשר לוקחים בחשבון שיש להקפיד על צירוף בטא-המוליזה (הילה קלה סביב המושבה) ב- S. pyogenes ובמוליזה אלפא (הילה ירקרקה סביב המושבה) בשני הזנים של S. pneumoniae. מושבות).

הפניות

1. תורמים בוויקיפדיה. טריפטיקאז אני אגר. ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 17 בדצמבר 2018, 15:47 UTC. ניתן להשיג בכתובת: https://en.wikipedia.org
2. מעבדות בריטניה. אגר סויה טריפטין. 2015. ניתן להשיג ב: britanialab.com
3. מעבדות Neogen. אגר סויה טריפטי. ניתן להשיג ב: foodafety.neogen.com
4. פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. ארגנטינה. Panamericana SA העריכה
5. מעבדות BD. טריפטיקאז אני אגר. 2014. זמין בכתובת: .bd.com