אגרתי סלמונלה Shigella הידוע גם בשם אגר SS הוא סלקטיבית ובינוניים הפרש בינוני, שעוצב במיוחד עבור בידוד של חיידק וחיידק של הסוגים סלמונלה ו- Shigella, הוא דגימות סביבתיות כגון קליני.
לאגר SS יש קומפוזיציה מורכבת; זה מורכב מתמצית בשר, פפטון, לקטוז, מלחי מרה, נתרן ציטרט, נתרן תיוסולפט, ציטראט פרי, אגר, אדום ניטרלי, ירוק בהיר ומים מזוקקים. בהתחשב בסלקטיביות הגדולה שלה, ניתן להזרע דגימות עם פלורה מעורבת בשפע.
אגר של אס אס עם מושבות של סלמונלה sp. מקור: Manurx27, מתוך Wikimedia Commons
במעבדות מיקרוביולוגיה נעשה שימוש נרחב במדיום סלמונלה-שיגלה לחקר הימצאותם של סלמונלה ושיגלה בדגימות צואה לשלשול, ביוב, מי שתייה ומזון.
לעיתים יש צורך להשתמש במרחבי העשרה מוקדמים (מרק לקטוז) ובמרח העשרה (מרק ציסטין סלניט) כדי להחלים זני סלמונלה.
צעדים אלה נדרשים כאשר יש חשד לקיומה של סלמונלה בכמות נמוכה מאוד, או כאשר יתכן כי השימוש בזן מתעלל בתהליכים האופייניים לייצור תעשייתי, בעיקר מזון מעובד. רצוי גם להעשיר דגימות צואה מחולים שטופלו באנטיביוטיקה.
לאחר מכן, ניתן לזרוע את המרק המועשר על אגר סלמונלה-שיגלה ותקשורת דומים אחרים, כמו אגר קסילוזה, ליזין deoxycholate (XLD) ואגר Hektoen אגר (HE).
בָּסִיס
לכל מרכיב במדיום התרבות סלמונלה-שיגלה יש תפקיד ספציפי, והתערובת כולה מספקת לו את התכונות המאפיינות אותו.
כוח מזין
תמצית הבשר והפפטון (המתעכל עם קזאין ורקמות מן החי) מספקים את החומרים המזינים הנדרשים (ניטרוגנים, פחמן וויטמינים) להתפתחות מיקרואורגניזמים המסוגלים לסבול את שאר המרכיבים.
עֲקֵבִיוּת
אגר-אגר אחראי לספק את העקביות המוצקה למדיום.
סֶלֶקטִיבִי
מדיום זה הוא סלקטיבי ביותר מכיוון שהוא מכיל מלחי מרה, נתרן ציטראט, וירוק בהיר. לפיכך, זה מעכב את צמיחתם של כל חיידקי Gram חיוביים ורוב הבזילי שלילי גראם, כולל כמה קוליפורמים.
בעוד שחיידקים מהסוג סלמונלה וכמה זני שיגלה אכן תומכים בתרכובות אלה.
בעיקר, סוג הסלמונלה עמיד מאוד בפני מלחי מרה, עד כדי כך שהם מסוגלים לחיות בכיס המרה של חלק מחולי הנשיאה אשר כל הזמן שופכים את החיידקים בצואה שלהם.
דִיפֵרֶנציִאָלִי
לקטוז הוא הפחמימה המותססת המסייעת להבדיל בין זני תסיסה של לקטוז לבין תוססים שאינם תוססים. הוכחה על תכונה זו על ידי נוכחותו של אינדיקטור ה- pH, אשר במדיום זה הוא אדום פנול.
זני תסיסה של לקטוז מעניקים מושבות אדומות, ואילו זנים שאינם מתסיסים הם חסרי צבע. מאפיין זה חשוב מאחר וסלמונלה ושיגלה אינן תוססות לקטוז.
מצד שני, מדיום זה מכיל נתרן תיוסולפט כמקור סולפיד וציטראט כמקור לברזל. שתי התרכובות מסוגלות להבדיל בין חיידקים המסוגלים לייצר מימן גופרתי. אלה מגיבים ליצירת משקעים נראים גלויים, בלתי מסיסים, שחורי גופרי שחור.
מאפיין זה נמצא בכמה זנים של הסוג סלמונלה. בדרך כלל מושבותיהן שטוחות ללא צבע ונקודה שחורה במרכזה. שאר הסלמונלות אינן מייצרות H 2 S ומתפתחות כמושבות חסרות צבע.
מצד שני, מושבות של הסוג שיגלה הן חסרות צבע שטוחות ללא השחרה.
הכנה
המדיום הזה פשוט מאוד להכנה.
שוקלים 63 גרם מהמדיום המסחרי המיובש וממיסים בליטר מים מזוקקים. מחממים את התמיסה ומערבבים. התערובת יכולה להרתיח עד דקות.
אסור לחסום את המדיום הזה באופן אוטומטי. לאחר המסה הוא מוגש ישירות על צלחות סטריליות בודדות או כפולות.
כשהם מתמצקים, הם מסדרים בצורה הפוכה על טסיות הדם ונשמרים במקרר (2-8 מעלות צלזיוס) עד לשימוש.
המדיום שאחרי ההכנה צריך להישאר על pH 7.2 ± 0.2 ובצבע אדום כתום.
חשוב לאפשר לפלטות להתחמם לפני זריעת הדגימות. ניתן לזרוע את הדגימה המקורית ישירות, לפרוק חומר על חלק מהאגר ואז לפסים משם.
במקרה של שימוש במרקלים מועשרים, העבירו חלק ממרק הסלנית וזרעו עם מרית דריגלסקי.
דגירה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות באירוביוזיס.
קחו בחשבון שמספר הגרמים שיש לשקלול ו- pH הסופי של המדיום יכולים להשתנות מבית מסחרי אחד למשנהו. הבסיס האמצעי מביא תמיד את האינדיקציות להכנתו.
להשתמש
משתמשים בו לעתים קרובות בניתוח תרבות צואה ובמחקר המיקרוביולוגי של מי שפכים, מי שתייה ודגימות מזון.
מכינים לעתים קרובות צלחות כפולות, מצד אחד אגר סלמונלה-שיגלה מונח ומצד שני אגר XLD.
מגבלות
- כמה זני שיגלה אינם צומחים במדיום זה. לכן לא מומלץ לבידוד ראשוני של מין זה.
-לא כל מושבה שקופה עם מרכז שחור מעידה על סלמונלה; יש לבצע בדיקות ביוכימיות בכדי לאתר זיהוי נכון, מכיוון שמושבות זני חלבון מסוימים לא ניתנות להבחנה מזו של סלמונלה.
המדיום המיובש חייב לדאוג לחשיפה לסביבה, מכיוון שהוא היגרוסקופי מאוד. לכן יש לשמור אותו בסביבה יבשה וסגורה היטב. פתוח לתקופות קצרות מאוד.
-כל הזמן מלחי המרה במדיום עשויים לזרז, ויוצרים תמונה הדומה למחצלת בתוך האגר, אך הדבר אינו משפיע על התוצאות.
- כמה זני שיגלה יכולים להתסיס באטיות לקטוז.
QA
כדי להוכיח כי המדיום עובד נכון, רצוי לשתול זני בקרה ידועים או מוסמכים ולבחון אם הגידול עומד במאפיינים הצפויים.
לשם כך ניתן להשתמש בזנים של E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium או Enterococcus faecalis.
התוצאות הצפויות הן:
Enterobacter ו- Klebsiella ------ מושבות גדולות ומוקואידים אדומים או ורודים.
Shigella flexneri ---------- מושבות שטוחות שקופות או חסרות צבע.
סלמונלה טיפימוריום ------ מושבות חסרות צבע עם מרכזים שחורים.
Enterococcus faecalis -------- עיכוב מוחלט.
הפניות
- מעבדות דיפקו פרנסיסקו סוריה מלגיזו. אגר סלמונלה-שיגלה. 2009. זמין בכתובת: f-soria.es
- מעבדת BD. BD סלמונלה-שיגלה אגר. 2013. זמין ב: bd.com
- מעבדות בריטניה. סלמונלה-שיגלה אגר. 2015. ניתן להשיג ב: britanialab.com
- אבחון וולטק. סלמונלה-שיגלה אגר (SS Agar). 2010. ניתן להשיג ב: andinamedica.com
- פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. עריכה Panamericana SA ארגנטינה.
- Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. מהדורה חמישית עריכה Panamericana SA ארגנטינה.