אגר מלח מניטול או מלח manitol הוא סלקטיבית בינונית מוצקה ותרבות הפרש. הוא נוצר על ידי צ'פמן לבידודם של קוקאיות חיוביות גרם חיוביות, במיוחד Staphylococcus aureus.
עם זאת, כדאי גם לבודד את Staphylococus epidermidis, שלעתים יכול להיות נוכח כפתוגן אופורטוניסטי, ואת Staphylococcus saprophyticus, פתוגן שתן מוכר, בקרב מינים אחרים.
א. פיולה עם מדיום אגר מניטול אגר מוכן. ב. צלחות אגר מניטול מלוחים זרעים בזני חיידק מנימיטול תוססים ולא מתסיסים. מקור: A ו- B: תמונות שצולמו על ידי הסופר MSc. מריאלסה גיל.
כמה Enterococcus מסוגלים לצמוח על מדיום זה, כמו גם מוטות מסוימים ליצירת נבגים עם גרם.
מדיום זה שימושי מאוד בניתוח דגימות קליניות, אך הוא משמש גם במחקר המיקרוביולוגי של מזון ובבקרת איכות של מוצרים תעשייתיים, כגון קוסמטיקה, תרופות, בין היתר.
מניטול אגר מלוח מורכב מתמציות ופפטונים מבשר בקר, טריפטין, מניטול, נתרן כלורי, פנול אדום ואגר.
בָּסִיס
אגר המניטול הוא סלקטיבי בזכות ריכוז המלח הגבוה שלו. מליחות פועלת כחומר מעכב ומונעת את צמיחתם של חיידקים גראם שליליים.
זה גם דיפרנציאלי בגלל נוכחותו של המניטול הפחמימה ומחוון ה- pH האדום של הפנול. מכאן, החיידקים המסוגלים לתסס את המניטול מייצרים חומצות, מחמצים את המדיום, הופכים את המושבות ואת המדיום לצהוב.
לעומת זאת, מושבות שאינן תוססות מניטול גדלות במדיום הנוטלות את החומרים המזינים המסופקים על ידי תמציות בשר ופפטונים וטריפטין. משם מפיקים החיידקים את הפחמן, החנקן, הוויטמינים והמינרלים הנחוצים לגדילתם.
המושבות במקרה זה יכולות להיות חלשות או ורודות חזקות, והמדיום נשאר באותו צבע או משתנה לפוקסיה.
אגר הוא החומר המספק את העקביות למדיום.
הכנה
להכנת ליטר אגר מניטול מלוח, 111 גרם של המדיום המיובש מהחברה המסחרית המועדפת נשקלים ומומסים בכ- 1000 מ"ל מים מזוקקים, בעזרת בקבוק.
החום מוחל תוך ערבוב תכוף של המדיום כדי לשפר את תהליך הפירוק. מרתיחים דקה.
הבקבוק מונח בחיטוי בטמפרטורה של 121 מעלות למשך 15 דקות.
בסוף הזמן, הוצא את הבקבוקון מה החיטוי, הניח לו לנוח והגיש בין 15 ל 20 מ"ל על כלים פטרי סטריליים כשהטמפרטורה היא כ 50 עד 55 מעלות צלזיוס.
מותר להתמצק, להזמין בצורה הפוכה בפלאקרוס ולשמור במקרר עד לשימוש. לפני שתשתה מדגם, חכה שהצלחת תגיע לטמפרטורת החדר.
הלוחות זרעים על ידי פסים או על ידי זריעת משטח עם מרית דריגלסקי. ה- pH הסופי של המדיום המוכן חייב להיות 7.4 ± 0.2
צבע המדיום המיובש בצבע בז 'בהיר וצבע המדיום המוכן אדום כתום.
יישומים
בשל הסלקטיביות הגבוהה שלו, מדיום זה אידיאלי לזריעה של דגימות עם פלורה מעורבת בה מבקשת נוכחות של Staphylococus aureus, כפתוגן העיקרי של סוג זה.
במובן זה, אחד השימושים השכיחים ביותר שלו הוא בניתוח המיקרוביולוגי של אקסודטים לועיים ודגימות פריקה מהאף, במיוחד לגילוי נשאי S. aureus אסימפטומטיים.
מדינות מסוימות יישמו ניתוח זה כדרישת חובה עבור אנשים שרוצים לעבוד כמוכרי מזון.
בקרה זו מונעת התכווצות של אנשים הנשאים של S. aureus, ובכך נמנעת הרעלת מזון מאסיבית כתוצאה מצריכת מזון המזוהם באנטוטוקסין סטפילוקוק.
זה יכול לכלול גם זריעת דלקות פצעים, תרבויות דם, CSF, שטיפת bronchoalveolar, בין היתר.
אגר מניטול מלוח שימושי לבידוד מושבות מחדש מתרבויות שתן מאגר CLED או אגר דם שגרם גילה אשכולות חיוביים של קוקאיות.
זה תקף גם בניתוח המיקרוביולוגי של מזון, מי שתייה, קרקעות, בין יישומים אחרים.
QA
לאחר שמכינים אצווה של צלחות עם אגר מניטול מלוח, רצוי לבצע בקרת איכות. זרעי בקרה נזרעים כדי להראות אם יש צמיחה או לא.
זני Staphylococcus aureus ידועים יכולים לשמש כבקרה חיובית. עליו לגדול באופן משביע רצון מושבות צהובות המתפתחות, וגם המדיום הופך לאותו צבע.
כמו כן, נוח לכלול זן ידוע של Staphylococcus epidermidis. עליו לגדול באופן משביע רצון מושבות ורודות מתפתחות, והמדיום נשאר באותו צבע או מתכהה עד ורוד חזק יותר.
כבקרה שלילית משתמשים בזנים שלא אמורים לצמוח במדיום זה. לדוגמה, ניתן לגדל זן ידוע של Escherichia coli או Klebsiella pneumoniae. התוצאה הצפויה היא עכבה מוחלטת, כלומר אין צמיחה.
בנוסף, יש לדגור על צלחת ללא חיסון. בו לא צריך להיות שום צמיחה או שינוי צבע.
חשוב שהפלטה לא תשמש אם ישנם סימנים להתדרדרות, כמו זיהום, התייבשות, שינוי צבע, בין היתר.
מחשבות אחרונות
כשאתה משתמש במדיום אגר מניטול מלוח, ישנם כמה היבטים חשובים שיש לקחת בחשבון:
- השגת צמיחה של מושבות צהובות אינה מצביעה על היותה Staphylococcus aureus. יש לזכור שכמה זנים של אנטרוקוקוס מסוגלים לגדול במדיום זה ולהתסיס תסיסה, כמו גם מוטות גראם חיוביים הנוצרים נבגים.
לכן חשוב לבצע גרם על המושבה ובדיקת קטלאז.
מצד שני, יש לקחת בחשבון שמיני סטפילוקוקוס אחרים שאינם אוראוס מסוגלים גם הם לתסס את המניטול. לכן חשוב לתרבות את המושבה למרק מזון מזין כדי לקחת משם ולבצע את בדיקת הקרישה.
בין המינים Staphylococcus בעלי חשיבות קלינית לאדם שמתסיסים את המניטול הם: S. aureus, S. simulans, S. capitis ssp capitis, S. capitis ssp urealyticus, S. xylosus, S. cohnii ssp urealyticum, בין היתר.
אחרים יכולים לתת תגובה משתנה, כלומר לפעמים חיובית ולעיתים שלילית. חלקם הם S. saprophyticus, S. haemolyticus, S. warneri, S. intermedius, בין השאר.
-לא מומלץ לקחת מושבות ישירות מאגר מניטול לביצוע בדיקת הקרישה, מכיוון שריכוז המלח הגבוה במדיום יכול להפריע לתוצאה.
בסופו של דבר, מומלץ לדגור את הלוחות הזרעים במניטול מלוח עד 48 שעות, מכיוון שכמה זנים של S. aureus יכולים להתסיס באטיות את המניטול, אם כי זה לא תדיר במיוחד.
הפניות
- מעבדות בריטניה. אגר מניטול מלוח. 2015. ניתן להשיג ב: britanialab.com
- "אגר מניטול מלוח". ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 31 אוקטובר 2018, 19:08 UTC. 17 בינואר 2019, 20:55, זמין בכתובת: es.wikipedia.org.
- Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. (מהדורה חמישית). ארגנטינה, עריכה Panamericana SA
- פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. ארגנטינה. Panamericana SA העריכה
- מעבדות BD. BD מניטול מלח אגר. 2013. זמין ב: bd.com.