אגר תזונתי: רציונל, הכנה ושימושים - ביולוגיה - 2025

אגר המזין הוא מדיום לא סלקטיבי ואין תרבות מוצקה הפרש. כל מיני חיידקים שאינם דורשים מבחינה תזונתית גדלים במדיום זה.

זהו מדיום פשוט ולמרות שמו, הוא מכיל ערך תזונתי נמוך יותר בהשוואה לתקשורת דומים אחרים, דוגמת עירוי מוח מוח או טריפטיקז סויה אגר.

המושבה סופרת על אגר מזין

התועלת שלה במעבדה מגוונת מאוד. הוא משמש בעיקר למינים תת-תרבותיים, לשמירה על זנים, לספירת מושבות, כבסיס להכנת אגר הדם, בין היתר.

באופן דומה, בשל צבעו הבז 'הבהיר, ניתן להבחין באופן יוצא דופן בייצור פיגמנטים הנוצרים על ידי זנים מסוימים של חיידקים, כמו הפיגמנט הירקרק של Pseudomonas aeruginosa, הפיגמנט האדום לבנים המיוצר על ידי Serratia marcescens בטמפרטורת החדר, הפיגמנט הצהוב הזהוב של Staphylococcus אוראוס, בין היתר.

בנוסף, זוהי אחת המדיות הזולות ביותר שגדלות בשוק.

בָּסִיס

כפי שכבר הוזכר לעיל, מדובר במדיום פשוט מאוד הנשען על אספקת חומרים מזינים לצמיחת חיידקים ללא הגבלה וללא תגובות מורכבות לפרשנות.

מכיוון שהמדיום שקוף, הוא אידיאלי לספירת מושבות בשיטת זריעת העומק.

הרכב

זה מורכב בעיקר מתמצית בשר או תמצית שמרים, פפונים או עיכול לבלב ג'לטין, אגר-אגר, נתרן כלורי ומים מזוקקים.

תמצית הבשר או השמרים והפפונים מייצגים את המקורות החיוניים לפחמן ומינרלים (חנקן, זרחן וגופרית), שישמשו את החיידקים כמקור לאנרגיה וגורמי גדילה.

באופן דומה, אגר-אגר הוא הבסיס של כל אמצעי המדיה התרבותיים המוצקים, ובא להחליף את הג'לטין, שהיה תרכובת הבסיס הראשונה בה השתמש רוברט קוך כדי לתת עקביות מוצקה לתקשורת שלו.

אגר הוא פוליסכריד המורכב מגלקטוז, גלקטומנן, אגרוז ואגרופקטין. הוא קבוע על 40 מעלות צלזיוס ונמס קרוב ל 100 מעלות צלזיוס.

הנתרן מצידו מספק למדיום את האוסמולולריות הנחוצה להתפתחות חיידקים.

בסופו של דבר, המים משמשים להתייבשות ופירוק התרכובות הקירוריות. יש להשתמש במים מזוקקים המותאמים ל- pH ניטרלי. אין להשתמש במי ברז כיוון שהם מכילים סידן ומגנזיום שיכולים להגיב עם פוספטים במדיום ויוצרים מלחים בלתי מסיסים.

הכנה

עבור ליטר אחד של אגר מזין, יש לשקול 31 גרם מהמדיום המיובש. מניחים אותו בבקבוק וממיסים אותו בליטר מים מזוקקים. לאחר 5 דקות עמידה, מחממים מעל מקור חום ומערבבים ללא הפסקה עד רתיחה למשך דקה או שתיים.

הכנת מדיום תרבות.

לאחר מכן מניחים את הבקבוק בחיטוי ומעוקרים בטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות.

עיקור במערכת החיטוי

בסוף הזמן זה מוסר מהחיטוי ומוגש בכלי פטרי סטריליים, באמצעות מכסה זרימה למינרית או מבער בונסן.

אם הכלים של פטרי חד פעמיים (פלסטיק), יש לחלק את המדיום כאשר אגר הטמפרטורה הוא כ- 50 מעלות צלזיוס, בכדי למנוע את עיוותם על ידי חום מוגזם.

אפשר להתמצק ולאחסן על בעל צלחת הפוכה ושומר במקרר בטמפרטורה של 2-8 מעלות צלזיוס עד לשימוש.

יש להזין את הלוחות לפני שנזרעים. אין להשתמש בצלחות אגר תזונתי אם הן מזוהמות או מיובשות.

יש להתאים את רמת החומציות של המדיום המוכן ל 7.3- 0.2.

יישומים

זהו המדיום התרבותי הפשוט ביותר המשמש במעבדת המיקרוביולוגיה. ניסוחו מצוין לגידול חיידקים שאינם דורשים.

השימושים העיקריים שלה מוסברים להלן:

כבסיס להכנת אגר הדם

מדיום זה משמש לעתים כבסיס להכנת אגר דם, אולם הוא אינו הבסיס הנפוץ ביותר.

לעורר את התריסותם של חיידקים יוצרי נבגים

מדיום תרבות זה שימושי במיוחד לגירוי התעקבות של חיידקים יוצרי נבגים כמו Bacillus sp.

לצורך כך נזרע זן של סוג Bacillus ומודגר במשך 24 שעות ב 37 מעלות צלזיוס באירוביוזיס. לאחר שהמושבות גדלו, הצלחת נתונה בלחץ טמפרטורה, כלומר טמפרטורת התנור מוגברת ל -44 מעלות צלזיוס ונשאר למשך 24 שעות נוספות או להכניס למקרר למשך 24 שעות.

בסוף הזמן נוצרים מריחות מהתרבות ומוכתמות בכתם גראם או עם כתם נבג שפר-פולטון. נצפו בהם ביסילי עם אנדוספורס (נבגים בתוך הבאסילוס) ואקסוספוריות (נבגים מחוץ לבצילוס).

תחזוק זן

מעבדות תומכות בהוראה מחקרית או אוניברסיטאיות דורשות שמירה על חיידקים קיימא בעלי חשיבות קלינית למשך זמן רב ככל האפשר, על מנת להשתמש בבנק החיידקים (בקטריוטקה) לצורך עבודת מחקר או להכנת שיטות הוראה, שם התלמידים ילמדו לתפעל ולזהות את המיקרואורגניזמים הללו.

אגר תזונתי, כמו גם אגר עירוי לב מוח, יכולים לשמש למטרה זו. מכינים את האגר, מוזגים לצינורות עם מכסה בקליט ומוטים על בסיס, כך שהאגר מתמצק ויוצר בלוק בתחתית ופינה על פני השטח (מקור חליל).

כל צינור מסומן בשם החיידק שישזרעו בתאריך. כל אחד מהחיידקים יזרע על שפוע ויודגר במשך 24 שעות. ברגע שהמושבות גדלו, הצינורות מאוחסנים בטמפרטורת החדר.

יש לחדש את החיידק החיידק בין חודש לשלושה חודשים, על מנת למנוע זיהום והתייבשות של המדיום וכן מוות של החיידק.

בדרך זו ניתן לשמור רק על חיידקים שאינם בררניים.

ספירת המושבה

למרות שיש אמצעים מיוחדים לספירת מושבות, כגון אגר ספירה רגיל, ניתן להשתמש באגר מזין למטרה זו, אם על ידי זריעת שטח בעזרת מרית דריגאלסקי או על ידי עומק. מסיבה זו מועיל מאוד בניתוח המיקרוביולוגי של מזון ומים.

הפעלת בדיקות אבחון

מכיוון שמדובר במדיום שאינו מכיל דם, או כל תוספות אחרות, הוא אידיאלי לקחת מושבות שגדלו על מדיום זה לביצוע בדיקת הקטלאז.

באופן דומה, בשל צבעו הקליל, מצוין לבצע בדיקות אוקסידאז ישירות על שטח הזרע הזרע, ללא הפרעה.

התאוששות אירובי מזופילי ממי מלח פנאי (חופים)

אגר התזונה המוכן עם 10% מי ים שימושי להערכה של אירובי מזופילי במי החוף.

בדרך זו ניתן להעריך את רמת הזיהום האמיתית שיש למים עם מיקרואורגניזמים אלה, מכיוון שבדוגמאות מסוג זה התוצאות חופפות כאשר משתמשים בתקשורת תרבית המוכנה בדרך המקובלת.

זה הוכיח על ידי Cortez et al. בשנת 2013 בעבודת מחקר.

ניתן להסביר את זה בגלל השינוי הפתאומי שעוברים חיידקים כשהם עוברים מסביבה מיותרת לסביבה דלת מלח, ולכן המיקרואורגניזמים נכנסים למצב של עייפות בה הם קיימים, אך אינם מעובדים.

הפניות

1. "אגר תזונתי." ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 13 ספטמבר 2016, 20:33 UTC. 29 דצמבר 2018, 21:04 en.wikipedia.org
2. פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. ארגנטינה. Panamericana SA העריכה
3. Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. (מהדורה חמישית). ארגנטינה, עריכה Panamericana SA
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. השפעת מדיה תרבותית שהוכנה עם מי ים על מדדי בריאות במים ימיים של מכוני ספא בצ'יצ'ריביץ ', מדינת פלקון, ונצואלה. גב 'סוק וין מיקרוביול 2013; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M ו- Cardoso M. איכות מיקרוביולוגית של מים להזרמת מינונים, לחזירים. Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
6. גרסיה פ, פארדס פ, פרננדז דל באריו מ '(1994). מיקרוביולוגיה קלינית מעשית. אוניברסיטת קדיז, מהדורה שנייה. שירות פרסומי UCA.