אגר מקונקי: רציונל, הכנה ושימושים - ביולוגיה - 2025

אגר ה- MacConkey הוא מדיום יציב המאפשר בידוד בלעדי של חיידקים גראם שליליים. מסיבה זו זהו מדיום סלקטיבי ומאפשר גם הבחנה בין תסיסה לקטוז לבזילי שאינו מתסס, מה שהופך אותו למדיום דיפרנציאלי. זהו אחד ממדיות התרבות הנפוצות ביותר במעבדה למיקרוביולוגיה.

מדיום זה משמש בעיקר לבידוד של ביסילי גראם שליליים השייכים למשפחת Enterobacteriaceae, כולל מינים אופורטוניסטיים ואנטורטופתוגניים.

אגר MacConkey זרע בשני סוגים של חיידקים. מושבות תסיסה לקטוז בצד שמאל, מושבות תסיסה ללא לקטוז בצד ימין.

ניתן להשתמש בו גם כדי לבודד את הביצילים ההומיים האחרים שחיים בדרכי העיכול, אך אינם שייכים ל- Enterobacteriaceae, כמו Aeromonas sp, Plesiomonas sp, בין היתר.

לבסוף, הוא יכול לבודד באזילי Gram-Negative-תוססים אחרים שאינם בעלי גלוקוז, המצויים בסביבה, מים או קרקעות, אך לעיתים יכולים להיות פתוגנים אופורטוניסטים כמו Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alcaligenes sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, בין היתר.

בָּסִיס

אגר מק'קונקי

את יסוד המדיום הזה ניתן להסביר באמצעות תיאור מרכיביו, שכן לכל אחד מטרה שקובעת את המאפיין שלו.

מלחי מרה וסגול גביש

במובן זה, לאגר MacConkey יש קומפוזיציה מורכבת. קודם כל הוא מכיל מלחי מרה וסגול גביש.

אלמנטים אלה אחראיים לעכב את צמיחתם של חיידקי Gram חיוביים וכמה חיידקים גריליים שליליים. בתורו, הוא מעדיף את התפתחותם של בסילי גרם שליליים שאינם מושפעים מחומרים אלה. לכן זהו מדיום סלקטיבי.

אומרים שהוא מעט סלקטיבי בהשוואה לתקשורת אחרת שמעכבת גם את צמיחתם של חיידקים גראם חיוביים וגם את רוב חיידקי הגראם השליליים.

פפטונים, פוליפקטונים ולקטוז

הוא מכיל חומרים המספקים את החומרים התזונתיים הנחוצים למיקרואורגניזמים המתפתחים בסביבה זו, כמו פפטונים, פוליפקטונים ולקטוז.

לקטוז הוא נקודת המפתח לכך שהמדיום הוא מדיום דיפרנציאלי, מכיוון שמיקרואורגניזמים שיש להם יכולת לתסוס לקטוז יפתחו מושבות ורודות חזקות.

ישנם חיידקים שיכולים לתסס לקטוז לאט או חלש, לפתח מושבות בצבע ורוד בהיר ונשארים חיוביים ללקטוז.

אלה שאינם תוססים לקטוז משתמשים בפפטונים כמקור אנרגיה, מייצרים אמוניה, מה שמסבירים את המדיום. מסיבה זו המושבות שמקורן חסרות צבע או שקיפות.

מחוון PH

שינוי הצבע מושג באמצעות תרכובת חיונית נוספת שיש לאגר MacConkey. תרכובת זו היא אינדיקטור ה- pH, שבמקרה זה הוא אדום נייטרלי.

התסיסה של לקטוז מייצרת ייצור של חומצות מעורבות. הם מחמצים את המדיום לחומציות מתחת ל 6.8.

זה גורם לכך שמחוון ה- pH פונה לכיוון גוון ורוד עמוק. עוצמת הצבע עשויה להשתנות בהתאם ל- pH הסופי.

מים מזוקקים, נתרן כלורי ואגר

מצד שני, הוא מכיל מים מזוקקים ונתרן כלוריד המעניקים לחות בינונית ואיזון אוסמוטי. לבסוף, המדיום מכיל אגר, שהוא הבסיס המספק את העקביות של המדיום המוצק.

לתווך האגר של MacConkey המוכן צריך להיות pH סופי המותאם ל -7.1 ± 0.2.

הכנה

עבור ליטר אחד של אגר MacConkey, יש לשקלל 50 גרם מהמדיום המיובש, ואז להכניס אותו לבקבוק ולהמיס אותו בליטר אחד של מים מזוקקים. לאחר 10 דקות של עמידה הוא מחומם, מתערבב ללא הפסקה עד לרתיחה למשך דקה.

לאחר מכן מניחים את הבקבוק בחיטוי ומעוקרים בטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. בסוף הזמן זה מוסר מהחיטוי ומניח להתקרר עד שהוא מגיע לטמפרטורה של 45 מעלות צלזיוס, כדי לשמש אחר כך בכלי פטרי סטריליים בתוך מכסה זרימה למינרית או מול מבער בונסן.

אפשר להתמצק ולאחסן במיכל צלחת הפוכה ושומר במקרר במקרר 2-8 מעלות צלזיוס עד לשימוש.

כדי להשיג אגר MacConkey שמעכב את אפקט ההשבעה המיוצר על ידי הסוג Proteus, משתמשים באגר MacConkey דל מלח.

שימושים באגר מק-קונקי רגיל

MacConkey Agar כלול בכל מערכות המדיה התרבותיות המסודרות לזריעת דגימות קליניות שהתקבלו במעבדה. זה שימושי גם במיקרוביולוגיה של מזון ובמיקרוביולוגיה סביבתית.

מגוון המוטות השליליים גראם הגדלים במדיום זה מביעים מאפיינים פנוטיפיים המסייעים באבחון חזקה של המין המדובר. לדוגמא הגודל, צבעם, עקביותם וריחם של המושבות, הם חלק מהתכונות שיכולות להנחות.

במדיום זה מייצרים מיני Escherichia coli, Klebsiella sp ו- Enterobacter sp מושבות ורודות חזקות, המוקפות באזור של מרה מובהקת.

ואילו חיידקים כמו Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp ו- Hafnia sp יכולים להופיע חסרי צבע לאחר 24 שעות או ורודים בהירים תוך 24-48 שעות.

בדומה, גם הסוגות פרוטאוס, אדוואדיאלה, סלמונלה ושיגלה מייצרות מושבות חסרות צבע או שקופות.

גרסאות אחרות של אגר MacConkey

ישנן גרסאות אחרות של MacConkey Agar שיש להן מטרות ספציפיות. הם מוזכרים להלן:

אגר מק-קונקי עם סורביטול

מדיום זה נועד להבדיל בין הזן ה enteropathogenic (enterohemorrhagic Escherichia coli O157: H7) משאר זני ה- Escherichia coli.

מדיום זה מחליף את הלקטוז הפחמימה לסורביטול. זני ה- E. coli enterohemorrhagic O157: H7 נבדלים מהשאר מכיוון שאינם תוססים סורביטול ולכן מושגות מושבות שקופות, ואילו שאר זני ה- E. coli מתסיסים את הסורביטול והמושבות ורודות חזקות.

אגר מק-קונקי ללא סגול גביש, וללא מלח

אגר זה שונה מאוד מאגר המקאקונקי הקלאסי, מכיוון שאין בו גביש סגול וחיידקים גראם חיוביים יכולים לצמוח.

מאידך, היעדר מלח מעכב את הופעת הנחיתה על האגר המיוצר על ידי חלק מהבוצילים האנטריים, כמו אלה של סוג ה- Proteus, ובכך מקל על הבידוד של כל החיידקים הקיימים, כולל חיידקים גראם חיוביים.

אגר מק'קונקי עם cefoperazone

וריאנט זה של MacConkey Agar תוכנן לבודד בתחילה את Laribacter hongkongensis ונמצא מאוחר יותר כשימושי לבידודו של ארקובקטר butzleri. שניהם מוטות Gram שליליים מעוקלים עמידים לספופרזון.

חיידקים אלה נקשרו לאחרונה לגורם במערכת העיכול ולשלשול נרכש אצל אנשים אסייתים ואירופאים, ומופיעים כשני פתוגנים עוצמתיים מתעוררים.

האנטיביוטיקה מאפשרת לעכב את הצומח הנלווה של דרכי העיכול, המעדיף את התפתחותם של חיידקים אלה, ומונע מהם להתעלם, מכיוון שהם דורשים 72 שעות לגדול.

אגר MacConkey שהוכן עם מי ים בסרט 10% v / v

וריאנט זה שימושי להערכת מדדים תברואתיים סניטריים של חיידקים לזיהום צואה, כולל סה"כ קוליפורמים וקוליפורמים צואתיים במים מלוחים פנאי (חופים ומפרצים).

Cortez et al בשנת 2013 הראו כי המדיום שהוכן בדרך זו מגדיל משמעותית את ההתאוששות של מיקרואורגניזמים אלה בסביבת המלח, לעומת השימוש באגר מק-קונקי שהוכן במים מזוקקים.

זה נובע מהעובדה שהמדיום המותאם ממריץ את צמיחתם של חיידקים שנמצאים פיזיולוגית במצב של חביון "בר-קיימא אך לא מעובד", ולכן הם אינם ניתנים להחלמה בתקשורת המקובלת.

הפניות

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. שימוש באגר Macefonazon cefoperazone לבידוד סלקטיבי של Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. אגר מק'קונקי. ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 4 אפריל 2018, 18:16 UTC. 29 דצמבר 2018, 15:22 en.wikipedia.org
3. פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. ארגנטינה. Panamericana SA העריכה
4. Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. (מהדורה חמישית). ארגנטינה, עריכה Panamericana SA
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. השפעת מדיה תרבותית שהוכנה עם מי ים על מדדי בריאות במים ימיים של מכוני ספא בצ'יצ'ריביץ ', מדינת פלקון, ונצואלה. גב 'סוק וין מיקרוביול 2013; 33: 122-128
6. גרסיה פ, פארדס פ, פרננדז דל באריו מ '(1994). מיקרוביולוגיה קלינית מעשית. אוניברסיטת קדיז, מהדורה שנייה. שירות פרסומי UCA.