אגר קמח תירס: רקע, הכנה ושימוש - ביולוגיה - 2025

אגר תירס הארוחה הוא מדיום תרבות מוצק, כוח תזונתי נמוך, שימושי עבור subculturing של פטריות מסוימות עבור הוכחת chlamydospores זנים של קנדידה אלביקנס המורכב. באנגלית זה מכונה תירס ארוחה אגר.

למדיום הקמח תירס קונבנציונאלי יש הרכב פשוט מאוד, הוא מכיל קמח תירס, אגר-אגר ומים. בשל רמת התזונה הנמוכה שלו, הוא אידיאלי לשימוש בתחזוקת זנים פטרייתיים לפרקי זמן מתונים, בעיקר פטריות שחורות.

א. ייצוג גרפי של מתחם קנדידה אלביקנס על אגר קמח תירס. ב. כלמידוספורס של מתחם קנדידה אלביקנס שנראה מתחת למיקרוסקופ, נוצר על אגר קמח תירס. מקור: A. GrahamColm / B. מאת: CDC / Dr. ויליאם קפלן, באדיבות: ספריית תמונות לבריאות הציבור.

עדיף את הספורולציה של מתחם קנדידה אלביקנס במדיום זה, אם להוסיף 1% מ- Tween 80 במהלך הכנת האגר. היווצרות כלמיודוספוריות אופיינית למין זה ולמעשה היחיד שמשפיע על בני אדם.

ישנם מינים אחרים היוצרים כלמיפרוסות, אך סביר להניח שהם לא ישפיעו על בני אדם, כמו קנדידה אוסטרליס, הנמצאים בגלישת פינגווין, או C. clausenii, שהוא ספראפט כמעט ולא נמצא. באופן דומה, באופן חריג המינים C. stellatoidea ו- C. tropis יכולים להיווצר אותם.

מצד שני, תוספת גלוקוזה למדיום קמח התירס מעדיפה היווצרות של פיגמנטים בגזעי Trichophytom rubrum.

חשוב לציין כי ישנם פטריות שאינן מהוות היפות או פסאודוהיפות באגר קמח תירס, כמו Cryptococcus neoformans, השונות מז'אנרים אחרים.

אגר קמח תירס ניתן להכין בבית במעבדה או להשתמש גם בתקשורת מסחרית.

בָּסִיס

קמח תירס הוא המצע, אגר הוא חומר הממצק, ומים הם הממס.

אגר קמח תירס ניתן להשלים עם tween 80 (sorbitan monooleate או polysorbate polyester 80). תרכובת זו מפחיתה את מתח השטח של המדיום בגלל כוחו המתחלב.

זה גם יוצר סביבה עוינת שמעכבת את הכפלה של תאים מוגזמים ומגרה את צמיחתם של מקפים, ומעדיפה גם את הייצור של כלמידיפורס; האחרון נחשב למבני התנגדות. מבנה זה מסייע בזיהוי המינים של קנדידה אלביקנס.

מצידו הגלוקוזה במדיום זה מגדילה את יכולת יצירת הפיגמנט של כמה פטריות.

יש לציין כי המדיום עם קמח תירס עם גלוקוז אינו מועיל להפגנה של כלמידיפורס במתחם קנדידה אלביקנס.

הכנה

הכנת אגר קמח תירס ביתי

שוקלים 47 גרם קמח תירס צהוב וממיסים אותו ב 500 מ"ל מים מזוקקים. מחממים ל 60 מעלות צלזיוס תוך ערבוב התכשיר למשך כשעה. לאחר מכן יש לסנן דרך חתיכת גזה וכותנה, או לחלופין ניתן לסנן אותה שוב על ידי העברת התכשיר דרך נייר פילטר Whatman מספר 2.

מלא את הנפח ל 1000 מ"ל עם מים מזוקקים. מוסיפים 17 גרם אגר-אגר, מחממים עד להמסה. החיטוי אוטומטית למשך 15 דקות בטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס.

מגישים בכלי פטרי סטריליים. מאחסנים במקרר.

צבע המדיום המוכן לבנבן במראה גושני.

אם אתה רוצה להכין קמח תירס עם גלוקוז לתכשיר שתואר לעיל, הוסף 10 גרם גלוקוז.

אגר קמח תירס מסחרי

שוקלים 17 גרם מהמדיום המיובש וממיסים בליטר מים מזוקקים. ניתן לחמם את התערובת, לנער בעדינות להתמוסס לחלוטין. יש לעקר במערכת החיטוי בטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס, 15 קילוגרמים למשך 15 דקות.

יוצקים לתבשילי פטרי סטריליים. בואו להתמצק. הופכים ושומרים במקרר עד לשימוש. טמפרטורה לפני השימוש.

החומציות צריכות להיות 6.0 ± 0.2 בחום של 25 מעלות צלזיוס.

אגר קמח תירס עם Tween 80

כדי לעמוד בתקן ISO 18416, יש להכין אגר קמח תירס כדלקמן:

שקלו 65 גרם לליטר והוסיפו 10 מיליליטר של Tween 80. מחממים ומרתיחים מספר דקות עד להמסה, תוך הקפדה שלא להתחמם יתר על המידה. יש לעקר בחום של 121 מעלות למשך 15 דקות.

אגר קמח תירס עם גלוקוז

כדי לשפר את העוצמה הכרומוגנית של מושבות Trichophyton rubrum ולהבדיל אותן מ- T. mentagrophytes, ניתן להוסיף 0.2% גלוקוז לפורמולה המקורית. אינך זקוק ל- Tween 80, מכיוון שגלוקוז מעכב את היווצרותם של כלמידיפורס.

להשתמש

בעיקר, השימוש באגר קמח תירס מיועד לחקר זני הקנדידה, ועוזר בזיהוים באמצעות התבוננות אופיינית בכלמיודוספורס במין אלביקנס. כלומר השימוש באגר זה משמש כשיטת עזר לזיהוי שמרים אלו.

שני המינים saprophytic ו pathogenic יכולים להתפתח על אגר זה, אך כל אחד מהם יוצר מבנים מיסקליים אופייניים. לדוגמא, מינים מהסוג טורולופסיס אינם מייצרים mycelium ומתרבים רק על ידי בלסטוקונידיה.

באופן דומה, מינים Trichosporon ו- Geotrichum מייצרים ארתרוקונידיה על אגר קמח תירס ולעיתים קשה להבחין בין אחד לשני.

ארתרוקונידיות של הסוג Geotrichum מייצרים שלוחה של היפים הדומים למקל הוקי.

ייצור של פיגמנטים באמצעות אגר קמח תירס בתוספת גלוקוז שימושי בזיהוי הרוב Trichophytom.

זָרוּעַ

מושבות קנדידה חשודות שהושגו במדיום התרבותי הראשוני - אגר סבורוד - מדגימות קליניות, קוסמטיקה, קרקעות, בין היתר, מתועבות על אגר קמח תירס. המדיום מוזרע ומודגר ב 22 מעלות צלזיוס למשך 24 עד 48 שעות. ניתן להאריך את זמן הדגירה במידת הצורך.

הדגמה של כלמידוספור

לצורך כך יש לבצע חיסון של אגר קמח התירס עם Tween 80 בטכניקת Dalmau. שיטה זו מורכבת מלקיחת חלק מהמושבה החשודה עם ידית הפלטינה וביצוע שלושה חתכים מקבילים באמצע, תוך שמירה על הידית על 45 מעלות. יש להפריד את החיתוכים במרחק של 1 ס"מ אחד מהשני.

לאחר מכן, מונח חיפוי שכבה בעבר בוהק על הפסים שנזרעו, כך שחציו מכוסה והשני נחשף.

דגרו את הלוחות הזרעים בחום של 30 מעלות למשך 48-72 שעות ואז בדקו מתחת למיקרוסקופ דרך תלוש הכיסוי.

שמירה על זנים פטרייתיים

לשמירה על זנים, הלוחות הזרעים והגדולים נשמרים במקרר (4-8 מעלות צלזיוס). בדרך זו הם יכולים להימשך מספר שבועות ולהשתמש בהם למטרות הוראה או מחקר.

QA

לבקרת הסטריליות, דוגמה של צלחת ללא חיסון בטמפרטורת החדר, צפוי שלא יהיה שום צמיחה או שינוי צבע.

לבקרת איכות ניתןזרע זנים ידועים כגון: Staphylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

התוצאות הצפויות הן עיכוב חלקי ל- S. aureus ו- E. coli. בעוד שצפויה צמיחה משביעת רצון בשאר הזנים.

אספרגילוס ניגר גדל עם מושבות שחורות וספורליות בזמן משוער של 5 ימי דגירה.

מושבות שמרים בקנדידה אלביקנס עם ייצור כלמידיפור.

Saccharomyces cerevisiae מייצרים תאי שמרים גדולים.

מגבלות

בתחתית הצלחת נוצר משקע צהוב שלא צריך להתבלבל עם מושבות.

הפניות

1. מעבדות Neogen. אגר תירס אגר. ניתן להשיג ב: foodafety.neogen.com.
2. מדיה תרבות מיקרוקיט. אגר תירס אגר. ניתן להשיג ב: Medioscultivo.com.
3. Linares M, Solís F. מדריך לזיהוי שמרים. ניתן להשיג בכתובת: http: //www.guia.revibero.
4. Urcia F, Guevara M. Rev. Perú Med.Exp. בריאות הציבור, 2002; 19 (4): 206-208. ניתן להשיג ב: Scielo.com
5. Casas-Rincón G. Mycology General. 1994. המהדורה השנייה של האוניברסיטה המרכזית של ונצואלה, מהדורות ספריות. קראקס של ונצואלה.
6. פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. עריכה Panamericana SA ארגנטינה.
7. Koneman E, אלן S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). אבחון מיקרוביולוגי. מהדורה חמישית עריכה Panamericana SA ארגנטינה.
8. Castillo E. מחקר השוואתי של כמה שיטות מאקרו ומיקרוסקופיות לבידוד והכרה של הסוג קנדידה. הכומר הקולומביאני ממדעי הכימיה התרופות. 1970; 3 (1): 33-57. ניתן להשיג ב: Ciencias.unal.edu.co