אגר בהי: בסיס, הכנה ושימושים - ביולוגיה - 2025

אגר BHI או מוח לב העירוי אגר בינוני הוא תרבות מוצקה תזונתית. בספרדית אנו מתייחסים אליו כאל אגר עירוי לב מוח. זהו מדיום תרבותי לא סלקטיבי, כלומר כל סוגי החיידקים גראם חיוביים ושלילי גרם יכולים להתפתח, כמו גם כמה פטריות שמרים וחוטים.

זה מורכב מעירוי של מוח ולב בקר, הידרוליזאט פפטי מרקמות של בעלי חיים, הידרוליזה לבלב של קזאין, נתרן כלורי, גלוקוזה, נתרן פוספט ואגר.

צלחות BHI. מקור: תמונה שצולמה על ידי הסופר MSc. מריאלסה גיל.

יש לציין כי אגר BHI הוא אחד ממדיות התרבות הנפוצות ביותר במעבדות חיידקים. ניתן להשתמש בו ללא תוספים כתרבות ראשונית, תת-תרבות של מושבות המתקבלות במדיה סלקטיבית אחרת או לתחזוקה של זנים במעבדה.

מצד שני, זהו אמצעי אידיאלי שישמש כבסיס בהכנת חומרי הדברה מועשרים, כמו אגר דם ואגר שוקולד. שניהם אידיאליים לבידוד מיקרואורגניזמים תובעניים מנקודת מבט תזונתית. עם זאת, יש לציין כי מכיוון שהוא מכיל גלוקוז, הוא אינו מתאים לצפייה בדפוסי המוליזה.

כמו כן, ניתן להשתמש באגר BHI להכנת מדיה מיוחדת לבידוד מיקרואורגניזמים פתוגניים קשים לגידול במדיה נפוצה, ביניהם: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diphtheriae ו- Histoplasma capsulatum.

עם התוסף האנטיביוטי, אגר BHI הופך למדיום סלקטיבי לבידוד פטריות.

בָּסִיס

זהו אמצעי תרבות מזין לבידוד מיקרואורגניזמים תובעניים למדי, וניתן להגביר את העשרתו בתוספת דם ותוספי תזונה אחרים.

זהו מדיום תרבותי לא סלקטיבי, לכן הוא מאפשר גידול של רוב החיידקים גראם חיוביים ושליליים, כמו גם פטריות מסוימות. עם זאת, ניתן להפוך אותו לסלקטיבי בתוספת אנטיביוטיקה.

המדיום מכיל עירוי של מוח ולב עגל, הידרוליזאט פפטי של רקמות מן החי והידרוליזה של לבלב של קזאין; כל התרכובות הללו פועלות כמקור לוויטמינים, חומצות אמינו, חנקן ופחמן.

גלוקוז הוא פחמימה המספקת אנרגיה למיקרואורגניזמים ברגע שהתסיסו אותו. בינתיים, נתרן כלורי ודיודיום פוספט שומרים על איזון אוסמוטי ומספקים pH קרוב לניטרליות. לבסוף, האגר נותן עקביות בינונית ויציבה.

הכנה

שוקלים 52 גרם מהמדיום המיובש וממיסים בליטר אחד של מים מזוקקים. הביאו את התערובת למקור חום עד לרתיחה, תוך ערבוב תכוף במהלך תהליך הפירוק.

ניתן להכין צלחות אגר או טריזים של BHI ללא תוספים.

טריזים

להכנת טריזים, מגישים את ההכנה עד למילוי מחצית מכל צינור, מכסים ומעקרים בחיטוי בטמפרטורה של 121 מעלות למשך 15 דקות, כשאתה יוצא, מניחים על בסיס עד להתמצקותם. מאוחר יותר מאחסנים במקרר עד לשימוש.

טריזי BHI לחיידקים. מקור: תמונה שצולמה על ידי הסופר MSc. מריאלסה גיל.

צלחות

התערובת המומסת נבדקת אוטומטית בטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות, עם השארתה, מותרת להצטנן ל -50 מעלות צלזיוס ו -20 מ"ל מהמדיום מוגשים בכלי פטרי סטריליים. מותר להם להתמצק, הם הפוכים ונשמרים במקרר עד לשימוש. אפשר לפלטות להגיע לטמפרטורת החדר לפני הזריעה.

PH של המדיום חייב להישאר על 7.4 ± 0.2.

המדיום הגולמי בצבע בז 'והמדינה המוכנה בצבע ענבר בהיר.

הכנת אגר הדם

לאחר עיקור המדיום, יש לקרר לטמפרטורה של כ 45-50 מעלות צלזיוס, ואז להוסיף את הדם (50 מ"ל), לערבב בעדינות להומוגניזציה ולהגיש 20 מ"ל בכל צלחת פטרי. אם נוצרות בועות בצלחת, יש להעביר את הלהבה הקלה במהירות מעל הבועות בכדי לחסל אותן.

כמו כן, ניתן להכין מדיה מיוחדת על ידי הוספת התוספים המתאימים כאשר התערובת מגיעה לטמפרטורה של 45 עד 50 מעלות צלזיוס.

המדיום נשאר אדום דובדבן.

יישומים

השתמש ללא תוספי מזון

אגר BHI ללא תוספים שימושי כתרבות ראשונית ולזריעת זנים טהורים של מיקרואורגניזמים דורשים או בינוניים לצורך זיהוים לאחר מכן.

מכיוון שמדובר במדיום בצבע בהיר, הוא אידיאלי להתבוננות בפיגמנטים, מכיוון שהוא אינו מכיל חומרים מפריעים, ניתן לבצע עליו כמה בדיקות ביוכימיות, כמו אוקסידאז וקטאלז, או לבצע ניסויים ביוכימיים אחרים ממושבות מכאן. אגר.

כמו כן, טריזי אגר BHI נמצאים בשימוש נרחב לשמירה על זנים למשך זמן מסוים במעבדה (bacterioteca).

צלחות או טריזים שנזרעו לפני השטח עם זני חיידקים מודגרים ב 37 מעלות צלזיוס למשך 24 עד 48 שעות. בינתיים, בפטריות הטמפרטורה וזמן הדגירה יהיו תלויים בסוג הפטרייה אותה מבקשים.

כאגר בסיס להכנת אמצעי תקשורת אחרים

עם בסיס זה ניתן להכין אמצעי תקשורת מועשרים ובררניים.

מועשר

תפקידו העיקרי הוא לשמש בסיס להכנת אגר הדם לשימוש שגרתי במעבדות מיקרוביולוגיה. במיוחד הבסיס BHI תורם לבידוד Streptococcus sp. עם זאת, יש לו החיסרון שאינו מתאים לצפייה בדפוסי המוליזה מכיוון שהוא מכיל גלוקוז.

הוא משמש גם להכנת ארגר או אגר דם סוס לבידוד Haemophilus sp. לקבלת התוצאות הטובות ביותר, ניתן להוסיף תוסף העשרה (IsoVitaleX).

אם הדגימות מגיעות מדרכי הנשימה, ניתן להוסיף bacitracin לאגר בכדי לעכב את הצומח הנלווה ולהגדיל את ההסתברות להחלמה של המופילוס sp.

לחלופין, ניתן להכין אגר דם (כבש או אנושי) עם ציסטין טלוריט לבידוד הדיפטריה של Corynebacterium. כמו כן, כדאי להכין אגר דם ארנב, בתוספת ציסטין וגלוקוזה לבידוד הפרנציסלה טולרינסיס.

זריעת צלחות אגר הדם נעשית בתשישות והן מודגרות בחום של 35-37 מעלות צלזיוס למשך 24-48 שעות במיקרואירופיליות (5-10% CO ₂ ).

סֶלֶקטִיבִי

מדיום זה עם תוספת אנטיביוטיקה יכול להחליף את אגר סבורוד לבידוד פטריות.

השילוב של אגר BHI עם כלורמפניקול - ג'נטמיסין או פניצילין -, סטרפטומיצין ודם סוס הוא אידיאלי לבידוד כמוסת ההיסטופלזמה.

בהתאם למיקרואורגניזם שיש לבודד, מומלץ לבצע דגירה בטמפרטורה של 35-37 מעלות צלזיוס או בטמפרטורת החדר באירוביוזיס. לעיתים יש צורך בדגירה בשני טווחי הטמפרטורה, בעזרת 2 צלחות לשם כך.

יש לדגור בטמפרטורת החדר כמה פטריות כמו Trichophyton mentagrophytes.

QA

מכל אצווה שהוכנה, מומלץ לדגור צלחת או טריז 1 בטמפרטורה של 37 מעלות למשך 24 שעות ולוודא שאין צמיחה; זה חשוב במיוחד כשמכינים אגר דם, מכיוון שהוא אמצעי מזוהם בקלות.

מצד שני, ניתן להעריך את איכות המדיום על ידי חיסון זנים סטנדרטיים ידועים או מאושרים והתבוננות בהתפתחותם.

במובן זה, כדי להעריך את אגר BHI ללא תוספים, ניתן להשתמש בזנים של Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 או Candida albicans ATCC 10231. הם מודגרים ב 37 מעלות צלזיוס באווירוביוזה למשך 24 עד 48 שעות. בכל המקרים צפויה צמיחה משביעת רצון.

ניתן לזרוע זנים של סטרפטוקוקוס פיוגנים ATCC 19615, סטרפטוקוקוס פנאומוניאה ATCC 6305, או Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533 כדי להעריך צלחות אגר בדם.

זני חיידקים מודגרים ב 37 מעלות צלזיוס במיקרואירופיליות למשך 24 שעות, ואילו הפטרייה מודגרת בטמפרטורת החדר בתא לח עד 7 ימים. צפי משביע רצון צפוי בכל המקרים.

הפניות

1. מעבדות בריטניה. אגר אינפוזיה מוחית. 2015. ניתן להשיג ב: britanialab.com.
2. מעבדות BD. עירוי מוח מוח (BHI) אגר. 2013. זמין ב: bd.com.
3. מעבדות דיסקו פרנסיסקו סוריה מלגיזו, אגר עירוי מוח מוח. 2009.
4. מעבדת נוגן. אגר אינפוזיה מוחית. ניתן להשיג ב: foodafety.neogen.com
5. אגר גיל מ. אגר דם: בסיס, שימושים והכנה. 2018. זמין ב: lifeder.com.
6. תורמים בוויקיפדיה. עירוי מוח מוח. ויקיפדיה, האינציקלופדיה החופשית. 19 בספטמבר 2018, 03:58 UTC. ניתן להשיג ב: wikipedia.org. גישה 2 במרץ, 2019.
7. פורבס B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). אבחון מיקרוביולוגי של ביילי וסקוט. 12 ed. עריכה Panamericana SA ארגנטינה.